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6—BA对大豆愈伤组织诱导影响的初步研究

摘要：以大豆（Glycinemax）品种吉农21的胚轴、子叶、子叶节、胚根为外植

体，探讨了不同浓度6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）对大豆愈伤组织诱导的影响。结

果表明，对于大豆无菌苗不同组织部位的外植体，MS+1.0mg/LIAA+1.0mg/L

6-BA均为最佳的愈伤组织诱导培养基。

关键词：大豆（Glycinemax）；吉农21；6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）；愈伤组

织

大豆（Glycinemax）属于蝶形花科大豆属，别名黄豆，是古老的栽培作物

之一，至今大约有四、五千年的种植历史。我国不仅种植大豆历史悠久，而且是

栽培大豆的起源地，世界上其他国家的大豆大多是直接或间接从我国传播出去

的。大豆的组织培养研究始于20世纪60年代，但各种外植体的组织培养与再生

植株都十分困难。直到80年代中后期，大豆的组织培养工作才有了突破性的进

展，大豆的组织培养常用外植体包括真叶、下胚轴、子叶、子叶节、胚轴和胚等

[1-9]。近年来，也有报道可以通过胚尖诱导形成再生植株[10-12]，但多数再生体

系再生频率低、重复性差，而愈伤组织再生体系与直接再生体系相比具有重复性

好、出芽率高等特点。然而迄今为止，通过大豆愈伤组织途径获得再生植株的报

道较少。本研究探讨不同浓度的6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）对愈伤组织诱导的影

响，筛选出愈伤组织诱导的最佳培养基，进而能建立一个高效的大豆愈伤组织遗

传转化受体系统。

1材料与方法

1.1材料

大豆种子吉农21由吉林农业大学生物技术中心提供。

1.2方法

1.2.1种子的萌发选取饱满成熟的大豆吉农21的种子，用体积分数为70%

的乙醇消毒30s，再用质量分数为0.1%的升汞溶液消毒10min，用无菌水冲洗3～

5次后接种到MS基本培养基上，温度（25±2）℃，光照度2000lx条件下进行

培养。

1.2.2愈伤组织的诱导以培养7d后的无菌实生苗的胚轴、子叶、子叶节、

胚根为外植体，分别接种于不同愈伤组织诱导的培养基中，放入黑暗条件下进行

培养，20d后统计其愈伤组织诱导情况。愈伤组织诱导培养基分别为A培养基：

MS+1.0mg/LIAA+1.0mg/L6-BA；B培养基：MS+1.0mg/LIAA+2.0mg/L

6-BA；C培养基：MS+1.0mg/LIAA+3.0mg/L6-BA。

2结果与分析

2.1大豆胚轴愈伤组织的诱导

取培养7d后的无菌苗的胚轴为外植体，分别接种到A、B、C3种培养基上，

黑暗条件下培养20d（表1）。从表1中可以看出，对于胚轴来说，A培养基的

诱导效果最好，愈伤组织诱导率达到98.1%，并且形成的愈伤组织颜色呈淡黄色，

比较致密，状态良好（图1），而其他两种培养基上形成的愈伤组织褐化很多，

可能是因为6-BA浓度过高引起的。

2.2大豆子叶愈伤组织的诱导

取培养7d后的无菌苗的子叶为外植体，分别接种到A、B、C3种培养基上，

黑暗条件下培养20d（表2）。从表2中可以看出，对于子叶来说，A培养基的

诱导效果最好，愈伤组织诱导率可以达到100.0%，并且形成的愈伤组织颜色呈

淡黄色，比较致密，状态良好（图2）。

2.3大豆子叶节愈伤组织的诱导

取培养7d后的无菌苗的子叶节为外植体，分别接种到A、B、C3种培养基

上，黑暗条件下培养20d（表3）。从表3中可以看出来，对于子叶节来说，A

培养基的诱导效果最好，愈伤组织诱导率可以达到97.4%，形成的愈伤组织颜色

呈淡黄色，比较致密，状态良好（图3）。其他两种培养基较A培养基形成的愈

伤组织褐化增多，愈伤组织的生长受到阻碍。

2.4大豆胚根愈伤组织的诱导

取培养7d后的无菌苗的胚根为外植体，分别接种到A、B、C3种培养基上，

黑暗条件下培养20d（表4）。从表4中可以看出，对于胚根来说，A培养基的

诱导效果最好，愈伤组织诱导率可以达到68.2%，形成的愈伤组织颜色呈淡黄色，

比较致密，状态良好（图4）。其他两种培养基较A培养基形成的愈伤组织数目

明显减少，褐化严重，愈伤组织的生长受到严重阻碍，可能由于根部对于细胞分

裂素浓度更