缺血性脑血管病神经保护必要性与可行性.ppt

感谢大家观看第32页,共32页，星期六，2024年，5月*ImmunoblottingofAβspeciesfromtheculturemediaofneuroblastomacells:purifiedAβ(lane1);wtuntreated(wt,lane2)ortreatedwith100μg/mlofEGb761for48h(wt+EGb,lane3);mutantcelllineuntreated(swe/?9,lane4)ortreatedwith100μg/mlofEGb761for48h(swe/?9+EGb,lane5).ArrowsindicateAβmonomer(Aβ)oraggregatedoligomer(nAβ).Theblotrepresentsthreeindependentexperiments.Lane1：纯A?，Lane2：Wt细胞，Lane3：应用EGb761处理的Wt细胞，这2条泳道结果显示Wt细胞不产生A?单体和形成聚集体，Lane4：swe/△9细胞，结果显示酪酸诱导后有A?单体和聚集体的形成；Lane5：EGb761处理的经酪酸诱导的swe/△9细胞，结果显示A?聚集体被EGb761显著抑制.*图a：被酪酸刺激的swe/△9细胞呈绿色荧光，表示该细胞受刺激后线粒体功能异常；图b：未受酪酸刺激的Wt细胞呈红色荧光，表示该细胞线粒体功能正常；图c：EGb761处理48h的受刺激的swe/△9细胞大部分呈红色荧光，表示EGb761保护细胞的线粒体；图d：Ve处理处理48h的受刺激的swe/△9细胞少数呈绿色荧光，表示Ve保护细胞线粒体的作用较EGb761弱。实验选用Mitosensor作为荧光标记，可以反应细胞线粒体结构和功能的正常。如果线粒体正常表现为红色荧光（因为Mitosensor进入线粒体后能形成具体），但如果线粒体功能不正常，则不能形成具体而是以单体存在所以表现为绿色荧光。变异型细胞表达APP和Ab导致细胞凋亡，而野生型则没有。Ve，抗氧化剂的保护作用则没有金纳多的高。*左图选用比色法定量分析caspase3的活性，结果显示酪酸（BA）刺激诱导后swe/△9细胞caspase3的活性显著升高，应用EGb761处理swe/△9细胞的caspase3的活性显著下降，而Wt细胞受BA刺激后caspase3的活性变化不明显，可见caspase3的活性与A?密切相关。右图免疫印记的结果与比色分析的一致，BA诱导后Wt细胞和swe/△9细胞表达caspase-3（Lane2、3），但swe/△9细胞表达caspase-3更高（Lane3）。EGb761处理后swe/△9细胞表达caspase-3显著降低（Lane4）。将Wt细胞与A?一起培养，Wt细胞表达caspase-3增加（Lane5），但是应用EGb761处理后Wt细胞caspase-3表达显著降低（Lane6）。通过这两组结果可以得出细胞的凋亡是caspase-3所诱导的，A?增加了细胞caspase-3的表达和活性，EGb761由于能够降低细胞中A?的表达从而能够降低caspase-3活性，减少细胞的凋亡。(免疫印记加入肌动蛋白抗体：从图中最底端显示肌动蛋白的含量看，进行实验的每个蛋白泳道中的蛋白含量是相同)。关于缺血性脑血管病神经保护必要性与可行性脑血管病的危害基底节区脑梗死功能受损高达90%痴呆的生活质量损失70%然而，血管危险因素是可治疗的尽早发现无症状的小卒中进行神经保护很有必要第2页,共32页，星期六，2024年，5月从神经保护到脑保护神经保护血管保护胶质保护脑保护第3页,共32页，星期六，2024年，5月“神经血管单元”

血管/神经紧密相连，应视为完整的功能单位美国国立神经病学与卒中研究所（NINDS）提出的一个卒中治疗的概念模型包括神经元、血管内皮、胶质细胞以及细胞外基质的结构复合体第4页,共32页，星期六，2024年，5月脑梗死病灶常有脑白质损害第5页,共32页，星期六，2024年，5月脑白质缺血的易损性白质包含神经元间的信号传递，皮层与皮层下各中枢之间的联系，一旦病损，难以恢复穿髓动脉细长且无侧枝循环，易缺血胶质细胞丰富，容易水肿脑白质内缺乏神经细胞体、树突和突触，不少药物难以进入，因此对白质无法发挥保护作用脑白质不表达NMDA受体，因此NMDA受体拮抗剂对脑白质没有直接保护作用第6页,共32页，星期六，2024年，5月皮层和白质各占50%第7页,共32