细菌的分布与外界因素对细菌的影响.ppt

关于细菌的分布与外界因素对细菌的影响实验内容一、细菌的分布检查1.空气中细菌的检查2.水中细菌的检查3.皮肤消毒试验4.飞沫中细菌的检查二、外界因素对细菌的影响1.高压蒸汽灭菌法2.紫外线杀菌试验3.药物敏感试验第2页,共28页，星期六，2024年，5月实验目的1.掌握标准纸片扩散法（Ｋ－Ｂ）的原理、操作方法、结果的判读及临床意义．2.掌握皮肤消毒方法．3.熟悉人体咽喉部细菌检查方法．4.熟悉高压蒸汽灭菌法，紫外线灭菌方法．5.了解空气、水中细菌的检查方法．第3页,共28页，星期六，2024年，5月一、细菌的分布检查了解微生物在自然界及正常人体的分布，对于在医疗实践及某些科学实验中树立无菌观念有着重要的意义。?第4页,共28页，星期六，2024年，5月材料普通琼脂平板血琼脂平板MH琼脂平板３７℃温箱无菌棉签等普通琼脂平板血琼脂平板第5页,共28页，星期六，2024年，5月空气中细菌的检查（示教）左边培养皿菌落是未被过滤空气中的细菌，右边是经过滤空气中留有的少量细菌第6页,共28页，星期六，2024年，5月水中细菌的检查（示教）取水样1ml注入无菌空平皿内加15mL已融化并冷却至约45℃的培养基混匀倒置于３７℃温箱培养18-２４h后观察结果第7页,共28页，星期六，2024年，5月

1.分区标记2.接种3.培养皮肤细菌的检查：空白对照消毒后消毒前常用的皮肤消毒剂第8页,共28页，星期六，2024年，5月飞沫中细菌的检查用咳碟法将咽喉部细菌接种于血平板第9页,共28页，星期六，2024年，5月二、外界因素对细菌的影响当外界环境条件发生巨大改变，可导致微生物的主要代谢活动发生障碍，生长停顿，甚至死亡。第10页,共28页，星期六，2024年，5月消毒与灭菌原理：微生物由蛋白质、核酸、脂类等构成，极易受外界条件的影响，对多种物理、化学因素都敏感。消毒与灭菌就是根据这一原理抑制或杀死外环境中的病原微生物。第11页,共28页，星期六，2024年，5月1.高压蒸汽灭菌法（示教）原理：利用密闭的金属锅，密闭加热使锅内蒸汽压力增大，温度随之升高，杀菌力增强。第12页,共28页，星期六，2024年，5月手提式高压蒸汽灭菌器第13页,共28页，星期六，2024年，5月高压蒸汽灭菌器构造：为一双层的金属圆筒，两层之间盛水，外层坚厚，上方有金属厚盖。螺旋能紧闭盖门，使蒸汽不能外溢，因而蒸汽压力升高，其温度亦相应的增高。第14页,共28页，星期六，2024年，5月1.加水至外筒内，被灭菌物品放入内筒。2.盖上灭菌器盖，拧紧螺旋使之密闭。3.加热，同时打开排气阀门，排净其中冷空气，关闭排气阀。继续加热，待压力表渐渐升至所需压力时(103.4kPa,121.3℃)，保持压力和温度维持15～30min。4.待压力自行降至零时，慢慢打开排气阀，排除余气，开盖取物。使用方法第15页,共28页，星期六，2024年，5月注意事项：1）冷空气彻底排除；2）压力降为“0”时方可打开。在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压，所以，当水蒸气中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸气的温度低于饱和蒸气的温度。灭菌锅内留有不同分量空气时，压力与温度的关系见表第16页,共28页，星期六，2024年，5月用途凡耐高温和潮湿的物品，如培养基、生理盐水、衣服、纱布、棉花、敷料、玻璃器材、传染性污物等都可应用本法灭菌。第17页,共28页，星期六，2024年，5月2.紫外线杀菌试验原理：通过紫外线的照射，破坏及改变微生物的DNA结构，使细菌当即死亡或不能繁殖后代，达到杀菌的目的。第18页,共28页，星期六，2024年，5月波长200～300nm的紫外线具有杀菌作用，其中以265～266nm最强，这与DNA的吸收光谱范围一致。紫外线主要作用于DNA，使一条DNA链上相邻的二个胸腺嘧啶共价结合而形成双聚体，因而改变DNA的分子构型，干扰DNA的复制与转录，导致细菌的死亡或变异。紫外线释放的能量较低，故穿透力较弱，普通玻璃、纸张、尘埃、水蒸气等均能阻挡紫外线，故只能用于手术室、传染病房、细菌实验室的空气消毒，或用于不耐热物品的表面消毒。杀菌波长的紫外线对人体皮肤、眼睛有损伤作用，使用时应注意防护。紫外线杀菌试验第19页,共28页，星期六，2024