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1．(2016·全国丙卷)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamH
Sau3A(b)
Ⅰ和Ⅰ三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图为某种表达载体
的示意图(载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。
图(a)
图(b)
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
(1)BamH________
经Ⅰ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被酶切
后的产物连接，理由是________________________________________________
______________________________________________________________。
(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的
重组子，如图(c)所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的
有________，不能表达的原因是____________________________________
______________________________________________________________
。
图(c)
(3)DNADNA________
连接酶是将两个片段连接起来的酶，常见的有和
________，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是________。
【解析】(1)由题图可知，BamHⅠ和Sau3AⅠ两种限制性内切酶的共同
—GATC—
识别序列是—CTAG—，二者切割可以形成相同的黏性末端，因此经BamHⅠ酶
1
切得到的目的基因可以与图(b)所示表达载体被Sau3AⅠ酶切后的产物连接。(2)
在基因表达载体中，启动子应位于目的基因的首端，终止子应位于目的基因的尾
端，这样基因才能顺利地转录，再完成翻译过程，即顺利表达。图中甲所示的目
的基因插入在启动子的上游，丙所示目的基因插入在终止子的下游，二者的目的
基因均不能被转录，因此目的基因不能表达。(3)常见的DNA连接酶有E.coliDNA
连接酶和TDNA连接酶，其中TDNA连接酶既能连接黏性末端又能连接平末
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端。
【答案】(1)Sau3AⅠ两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端
(2)
甲和丙甲中目的基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终止子的
()
下游，二者的目的基因均不能被转录其他合理答案可酌情给分
(3)E.coliDNA连接酶TDNA连接酶TDNA连接酶(其他合理答案可酌情
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给分)
2(2012·)
．新课标全国卷根
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