细胞的衰老与凋亡.ppt

AB(C)左图：SEM，A：正常细胞；B：凋亡细胞；下图：TEM，(a)正常细胞；(b)凋亡细胞；(c)坏死细胞第21页,共37页，星期六，2024年，5月（二）生化特征DNA断裂：发生在核小体之间，产生180－220bp的倍数片段，电泳可见“DNAladder”;tTG（tissuetransglutaminase,组织转谷氨酰胺酶）的积累和活化（凋亡小体的保持）；凋亡特征性mRNA和蛋白质的出现。第22页,共37页，星期六，2024年，5月（三）诱导因子物理：射线、温度等；化学：ROS、钙离子载体、VK3、视黄酸、细胞毒素、DNA和蛋白质合成抑制剂，等等；生物：内源性的细胞环境变化（激素、细胞因子、抗体等）、有关信号分子的变化（TNF-α,Fas/Apo-1,等）。第23页,共37页，星期六，2024年，5月（四）细胞凋亡的检测形态学和组织化学检测：电镜（TEM、SEM）、DAPI染色、Giemsa染色，等等；DNA电泳：断裂DNA片断，“DNAladder”；TUNEL（Terminaldeoxynucleotidyltransferase-mediateddUTPnickendlabelling）法：一种对断裂DNA缺口的末端标记和显示法；彗星电泳法（cometassay）：荧光染料检测从凋亡细胞中扩散出来的断裂DNA片断；流式细胞分析（flowcytometry）：用流式细胞仪检测凋亡的亚二倍体细胞；……第24页,共37页，星期六，2024年，5月三、细胞凋亡的分子控制机制（一）Caspase家族：细胞凋亡的“起始者”和“执行者”一个特异性的蛋白酶家族，caspase:cysteineasparticacidspecificprotease（半胱-天冬氨酸特异性蛋白酶）；已发现11个成员（见表13-1）；caspaseBprocaspaseAcaspaseA(inactive)cleavage(active)(caspase的两个亚基连接区的天冬氨酸位点处切割）不同的caspases之间通过这种激活反应，形成一个信号传递、放大的级联反应（cascade），最终执行凋亡。第25页,共37页，星期六，2024年，5月通过caspase级联反应传递和扩大信号，诱发细胞凋亡。第26页,共37页，星期六，2024年，5月Caspase级联反应（caspasecascade）第27页,共37页，星期六，2024年，5月（二）细胞凋亡的诱导（trigger）：两条途径1，“死亡受体”途径（deathreceptorpathway）extracellular(extrinsic)pathwayadaptorproteinFas/FasLcaspasecascadeapoptosis2，线粒体途径（mitochondrialpathway）intracellular(intrinsic)pathwaydamage/stressmitochondriacytochromCreleaseprocaspase9complexcaspase9caspasecascadeapoptosis第28页,共37页，星期六，2024年，5月细胞凋亡的诱导途径：(A)“死亡受体”途径；(B)线粒体途径第29页,共37页，星期六，2024年，5月“死亡受体”途径和线粒体途径在细胞中共同产生凋亡“起始者”和“执行者”–caspases，引起细胞凋亡。第30页,共37页，星期六，2024年，5月Bcl-2BaxBid（三）Bcl-2家族：细胞凋亡的调节者Bcl-2：原癌基因，作用：抑制凋亡、延长细胞寿命为一基因家族，各成员间有一定的同源性（BH1,BH2,……保守区域）（Bcl-2Homologies）（见表-13-2）第31页,共37页，星期六，2024年，5