oIFN-tau在E.Coli中的可溶性表达及其活性的初步研究的开题报告.pdfVIP

oIFN-tau在E.Coli中的可溶性表达及其活性的初步

研究的开题报告

一、研究背景

IFN-tau（Interferontau）是一种独特的促进发育的干扰素，在反应

母体子宫的免疫适应，同时还能刺激母体细胞对胚胎保留。IFN-tau对黄

体生成作用有调节作用，能实现分泌乳汁，保持胎盘和具有受精卵着床

的天然粘液中卵巢激素水平。因此，IFN-tau具有很高的应用价值。目前

IFN-tau主要从天然来源中提取，生成量少，易受环境影响。为此，使

IFN-tau快速、高效地得到大量表达就很关键。

二、研究目的

本研究旨在通过在大肠杆菌中表达IFN-tau，初步探讨IFN-tau的表

达情况、可溶性和活性情况，为后续的IFN-tau研究奠定基础。

三、研究内容

1.构建IFN-tau表达质粒。本实验将IFN-tau基因克隆进入

pET21a(+)表达载体中，获得IFN-tau表达质粒。

2.大肠杆菌中的表达和可溶性评估。转化表达质粒后，产生IFN-tau

表达大肠杆菌，并评估IFN-tau在大肠杆菌中的可溶性。

3.表达物的纯化与活性评估。采用Ni-NTA亲和柱纯化大肠杆菌中的

IFN-tau，然后进行活性评估。

四、研究方法

1.扩增IFN-tau基因并构建IFN-tau表达质粒。利用PCR扩增IFN-

tau基因，然后构建IFN-tau表达质粒。

2.大肠杆菌中的表达和可溶性评估。将表达质粒转化到大肠杆菌中，

定向诱导表达，并收获大肠杆菌。使用B-PER蛋白质提取试剂和超声波

处理对大肠杆菌细胞裂解，评估IFN-tau在大肠杆菌中的可溶性。

3.表达物的纯化与活性评估。采用Ni-NTA亲和柱纯化大肠杆菌中的

IFN-tau，然后进行活性评估。

五、研究意义

1.基于大肠杆菌的可溶性表达IFN-tau是获得大量IFN-tau的主要手

段，研究可以为大量生产提供思路和方法。

2.IFN-tau是一种重要的生物功能分子，其研究对于母胎医学和动物

医学等领域的发展有着深远的意义。

3.本研究为后续利用IFN-tau做进一步研究提供了基础条件和技术支

持。