鸡蛋中地克株利、妥曲株利、妥曲株利砜、妥曲株利亚砜的测定 液相色谱串联质谱法.docx

鸡蛋中地克株利、妥曲株利、妥曲株利砜、妥曲株利亚砜的测定高效液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了鸡蛋中地克株利、妥曲株利、妥曲株利砜、妥曲株利亚砜的高效液相色谱-串联质谱检测方法。

本文件适用于鸡蛋中地克株利、妥曲株利、妥曲株利砜、妥曲株利亚砜的测定和确证。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

SN/T2318-2009动物源食品中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利亚砜和妥曲珠利砜残留量的检测高效液相色谱-质谱/质谱法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样经乙酸乙酯提取，反相色谱柱分离，以保留时间定性，供高效液相色谱-串联质谱仪测定和确证，内标法定量。

5试剂和材料

本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1乙酸乙酯：色谱纯。

5.1.2乙腈：色谱纯。

5.1.350%乙腈溶液：取50mL乙腈和50mL水混合均匀。

5.2标准品

5.2.1标准品：地克株利（Diclazuril，CAS号101831-37-2）、妥曲株利（Toltrazuril，CAS号69004-03-1）、妥曲株利砜（Ponazuril，CAS号69004-04-2）、妥曲株利亚砜（ToltrazurilSulfoxide，CAS号69004-15-5）、妥曲株利-D3（Toltrazuril-D3，CAS号1353867-75-0）。

5.2.2标准储备液（100.0μg/mL）：分别准确移取地克株利、妥曲株利、妥曲株利砜、妥曲株利亚砜标准物质适量，用甲醇溶解并定容,配制成100.0μg/mL的标准储备溶液，于-20℃避光贮存。

5.2.3混合标准溶液：分别准确吸取地克株利、妥曲株利、妥曲株利砜、妥曲株利亚砜标准储备液

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各1.0mL于10mL容量瓶中，50%乙腈溶液定容至刻度，配制成10.0μg/mL的混合标准溶液，-20℃避光贮存。

5.2.4妥曲株利-D3储备液：准确移取妥曲株利-D3标准物质适量，用甲醇溶解并定容,配制成10.0μg/mL的妥曲株利-D3内标储备溶液，于-20℃避光贮存。

5.2.5妥曲株利-D3工作液：准确移取妥曲株利-D3储备液1mL，用甲醇溶解并定容,配制成1.0μg/mL的妥曲株利-D3内标工作液，于-20℃避光贮存。

5.2.6标准工作溶液：分别准确吸取不同体积混合标准溶液，分别加入相同体积的妥曲株利-D3内标工作液，用空白基质定容至1.0mL，配制成地克株利、妥曲株利、妥曲株利砜、妥曲株利亚砜的

浓度分别为1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0、200.0ng/mL的系列标准工作溶液，临用现配。

6仪器和设备

6.1液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源。6.2天平：感量0.1mg和0.01g。

6.3涡旋混合器。

6.4高速冷冻离心机：最大转速10000r/min。6.5氮吹仪。

7分析步骤

7.1试液的提取

称取5g（精确至0.01mg）样品准确加入适量妥曲株利-D3内标工作液，再加入10mL乙酸乙酯，涡旋提取5min后，4℃9000rpm/min离心5min,准确吸取5mL上清液于N2流下缓慢吹干，用1mL50%乙腈溶液复溶后，过0.22μm滤膜，供超高效液相色谱串联三重四级杆质谱仪测定。

7.2仪器参考条件

7.2.1液相色谱参考条件

7.2.1.1色谱柱:C18，2.1×100mm，粒径1.8μm或性能相当。

7.2.1.2柱温：40℃。

7.2.1.3流动相：A：水，B：乙腈；梯度洗脱见表1。

7.2.1.4流速：0.3mL/min。

7.2.1.5进样量：10μL。

表1流动相及梯度洗脱条件

时间/min

流速/（mL/min）

流动相A/%

流动相B/%

0.00

0.3

60

40

4.00

0.3

20

80

5.00

0.3

0

100

6.00

0.3

0

100

6.10

0.3

60

40

8.00

0.3

60

40

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7.2.2质谱参考条件

7.2.2.1离子源：电喷