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个体生长—微生物细胞个体吸收营养物质,进行新陈代谢,原生质与细胞组分的增加为个体生长。直接法血球计数板间接法平板菌落计数法液体稀释法薄膜过滤计数法二、单细胞微生物的典型生长曲线定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲线,称为生长曲线。典型的生长曲线
(Growthcurve)营养物浓度对微生物生长速率和产量四、微生物的高密度培养微生物的高密度培养又称高密度发酵,一般是指微生物在液体培养中细胞群体密度超过常规培养10倍以上时的生长状态或培养技术培养微生物是研究和应用微生物的基础。一个良好的微生物培养装置的基本条件:按微生物的生长规律进行科学的设计,在能提供丰富而均匀营养物质的基础上,保证微生物获得适宜的温度和良好的通气条件(厌氧菌除外),为微生物提供一个适宜的物理化学条件和严防杂菌的污染。微生物培养技术的发展少量→大规模浅→深固体→液体静→动单批→连续游离→固定化从微生物到动植物细胞野生菌→工程菌单菌→混菌低密度→高密度人工→自动一、实验室培养法(一)固体培养法1、好氧菌的固体培养法:试管斜面、琼脂平板等。2、厌氧菌的固体培养:需要特殊的培养装置或器皿,要配制特殊的培养基,加入适当的还原剂,必要时要加入刃天青等氧化还原势指示剂。具体培养方法有:高层琼脂柱、厌氧培养皿、亨盖特滚管技术、厌氧罐和厌氧培养箱。(二)液体培养法1、好氧菌的液体培养:氧的供应是好氧菌生长、繁殖的限制因子。在培养中要保持培养液较高的溶解氧浓度。具体培养方法有:试管液体培养、三角瓶浅层液体培养、摇瓶培养和台式发酵罐等。2、厌氧菌的液体培养:厌氧罐或厌氧培养箱培养;好氧环境中加入巯基乙酸、半胱氨酸、维生素C等有机还原剂或铁丝等无机还原剂,在培养基上封一层石蜡油或凡士林-石蜡油。二、生产实践中培养微生物的装置(一)固态培养法1、好氧菌的曲法培养:原始的曲法培养就是将麸皮、碎麦或豆饼等固态基质经蒸煮和自然接种后,薄薄地铺在培养容器表面,使微生物即可获得充足的扬弃,又有利于散发热量,还十分有利于真菌产生孢子。根据制曲容器的形状和生产规模的大小,可把制曲方法分成瓶曲、袋曲、盘曲、帘子曲、转鼓曲和通风曲等。通风曲是一种机械化程度和生产效率都很高的现代大规模制曲技术,在我国酱油酿造业中广泛应用。2、厌氧菌的堆积培养法生产实践上对厌氧菌进行大规模固态培养的例子还不多见。我国的传统白酒生产中,采用大型深层地窖对固态发酵料进行堆积式固态发酵,这对酵母菌的酒精发酵和己酸菌的己酸发酵等都十分有利,因此可生产名优大曲酒(蒸馏白酒)。(二)液体培养法1、好氧菌的培养浅盘培养深层液体通气培养:发酵罐利用温度进行杀菌的定量指标有热死时间:指在某一温度下,杀死某微生物的水悬浮液群体所需的最短时间。例如,E.coli在60℃下为10min,Salmonellatyphi在58℃下为30min。热死温度:又称热死点,指在一定时间内(一般为10min)杀死某微生物的水悬浮液群体所需的最低温度。如根瘤土壤杆菌为53℃。(二)影响加压蒸气灭菌效果的因素1、灭菌物体含菌量2、灭菌锅内空气排除程度3、灭菌对象的pH:pH在6.0-8.0时微生物不易死亡4、灭菌对象的体积:影响热传导速率和热容量5、加热与散热速度四、化学杀菌剂、消毒剂和治疗剂评价抗菌化学物质的药效和毒性时,经常使用以下3种指标:最低抑制浓度(MIC):在一定条件下,某化学药剂抑制特定微生物的最低浓度;半致死剂量(LD50):在一定条件下,某化学药剂能杀死50%试验动物时的剂量;最低致死剂量(MLD):在一定条件下,某化学药物能引起试验动物群体100%死亡的最低剂量。某些抗生素的作用部位抗药性菌株的特点有:为了避免出现细菌的耐药性,用药时的注意事项①第一次使用的药物剂量要足;②避免在一个时期或长期多次使用同种抗生素;③不同的抗生素(或与其他药物)混合使用;④对现有抗生素进行改造;⑤筛选新的更有效的抗生素,这样既可以提高治疗效果,又不会使细菌产生抗药性。复习思考题1.试述分批培养条件下细菌的典型生长曲线。2.什么是同步生长,获得同步生长的方法有哪些?3.什么是连续培养,连续培养有何优点?4.根据微生物生长的最适温度不同,可以将微生物分为哪些类型?5.根据氧与微生物生长的关系可将微生物分为哪些类型?6.如何测定养殖水体中微生物的数量?7.什么是防腐、消毒、灭菌和化疗?日常生活中有哪些实例?8.抗生素、抗代谢物、生物药物素9.细菌耐药性机理是哪些?如何避免抗药性产生?连消法(continuousautoclaving):也叫连续加压蒸气灭菌法方法:让培养基在管道的流动过程中
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