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液体菌种生产技术规程第6部分：滑菇

1范围

本标准规定了滑菇（Pholiotamicrospora）液体菌种的术语和定义、生产要求、生产技术、标签、记录和存档等内容。

本标准适用于辽宁省内滑菇液体菌种生产。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB150压力容器

GB5749生活饮用水卫生标准GB50073洁净厂房设计规范GB/T12728食用菌术语

NY/T528食用菌菌种生产技术规程

NY/T1731食用菌菌种良好作业规范NY/T1742食用菌菌种通用技术要求NY/T1846食用菌菌种检验规程

3术语和定义

GB/T12728-2006界定的术语和定义适用于本文件。

4生产要求

4.1人员要求

应有经过专业培训且掌握基础理论知识、菌种生产和检验技术菌种生产所需要的技术人员和检验人员。

4.2场地环境要求

场地交通便利、远离垃圾场、畜禽场舍等污染源。菌种生产场地应符合NY/T528规定，生产环境应符合NY1731，生产用水应符合GB5749。

4.3生产设备与设施要求

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生产设备和设施布局合理、规模配套，符合NY/T528规定。接种室、培养室按照GB50073要求设计建造。

部分场所设施设备应达到如下要求：

a)接种室、固体菌种培养室、液体菌种培养室配备调温设施；

b)接种室、固体菌种培养室空间洁净度达到万级；液体菌种培养室空间洁净度达到十万级；

c)化验室和菌种保藏室具备相应检测设备、灭菌设施及常规实验用具。

4.4培养原料

化学试剂类、生物制剂及天然材料类应符合NY/T528要求，不溶于水固体物料小于40目。

4.5菌种

从具备相应资质的单位引种。选用优质、高产、稳定、抗逆性强、商品性好的滑菇品种，且种性清楚。菌种应符合NY/T528要求。

5生产技术

5.1母种制作

5.1.1推荐培养基配方

马铃薯200g，锯末50g，麦麸50g，葡萄糖20g，蛋白胨2g，VB10.01g，磷酸二氢钾1.5g，硫酸镁0.75g，琼脂粉18g~20g，水定容至1000mL，pH自然。

5.1.2培养基配置

按照生产量和配方5.1.1比例要求进行原料称量。容器内加水，锯末和麦麸用纱布包好后放在容器内共同煮，将去皮切片马铃薯置沸水中煮15min~20min，四层纱布过滤、定容至生产用量，加入琼脂充分融化后，再加入其他原料，分装到生产用试管中，分装量为试管长1/4~1/5，塞上胶塞，进行灭菌（0.11MPa~0.12MPa，灭菌30min），将灭菌后试管趁热摆放在斜面板上冷却，试管中培养基斜面长度为试管长度1/2~2/3。母种的容器、灭菌、灭菌效果的检查符合NY/T528要求。试管冷却后，试管内无明显水珠后用于下一步接种使用。

5.1.3接种和培养

按照1:20～1:30的比例，对保藏的母种进行转管接种，将接种后的试管放在培养温度为18℃~21℃、空气相对湿度为75%以下、避光、通风良好的条件下培养。

5.1.4母种检验

按照NY/T1846规程进行检验。培养期间每天检查2次，及时淘汰染菌或劣势菌种。逐支进行检验，肉眼观察要求菌丝棉絮状、较短，厚薄均匀一致、无角变，菌丝长势强，尖端菌丝一致、整齐；显微镜观察菌丝粗壮、无杂菌、无虫及无虫卵。菌丝长满，质量符合NY/T1742要求的菌种进入下一步生产流程。

5.1.5贮存及留样

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将制备好的母种放置于温度4℃、空气相对湿度60%～70%、通风、清洁、避光的条件下贮存。母种应留样备查，留样的数量应以每个批号3~5支为宜，留样至经液体菌种转接的栽培种（菌棒）出菇结束。

5.2摇瓶菌种制备

5.2.1推荐培养基配方

红糖20g，豆粉6g，磷酸二氢钾3g，硫酸镁1.5g，水定容至1000mL，pH自然。

5.2.2培养基配置

按照生产量和配方5.2.1比例要求进行原料称量。容器内加水，豆粉用纱布包好后放在容器内共同煮，将去皮切片马铃薯置煮沸的水中，煮15min~20min，四层纱布过滤，滤液按照生产量定容，加入其他原料，分装至摇瓶中，装液量为摇甁容量的1/5~2/5，胶塞封口，并用硫酸纸或牛皮纸包扎，培养基配置后应在4h内高压灭菌，0.11MPa~0.12MP