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(4)据图表可知,BamHⅠ切割得到的黏性末端为5-GATC,BglⅡ切割得到的黏性末端也为5-GATC,其黏性末端相同,故剪切后的目的基因能与质粒连接在一起;重组质粒形成后,在重组质粒上不再有BglⅡ的识别位点,质粒上有EcoRⅠ和BamHⅠ的识别位点,目的基因的编码顺序是从BamHⅠ到BglⅡ,用EcoRⅠ和BamHⅠ会将正向连接的目的基因片段剪切去除;正向连接的重组质粒会被切去20+25=45(kb)长度的片段,反向连接的重组质粒会被切去20kb长度的片段,电泳凝胶中,DNA相对分子质量越大,在凝胶中受到的阻力越大,迁移距离越短,正向连接的重组质粒被切割后两个片段的大小介于反向连接的重组质粒被切割后两个片段的大小之间,说明样品2是所需的基因表达载体。12345123454.(2023·福建龙岩三模)重组PCR技术是一项新的PCR技术,通过重组PCR技术能将两个不同的DNA连接成为一个新DNA分子。某科研小组从猪源大肠杆菌中扩增得到LTB和ST1两个基因片段,利用重组PCR技术构建了LTB—ST1融合基因,制备过程如图1所示。回答下列问题。图1(1)利用PCR技术扩增目的基因的过程中,向反应体系中加入的物质除了引物和模板链外,还需要加入________________________________________。利用PCR技术扩增目的基因,依据的生物学原理是。?(2)从P2、P3两种引物的角度分析,LTB和ST1基因能够融合的关键是PCR1和PCR2不能在同一个反应体系中进行,原因是??。(3)②过程(填“需要”或“不需要”)加入引物,原因是_________________________________________________________________________________________________________________。??耐高温的DNA聚合酶和四种脱氧核苷酸(或Taq酶和dNTP)DNA双链复制引物之间的结合会干扰引物和模板链的结合,从而影响PCR过程不需要两条母链的起始段位置的碱基序列即为引物,可以作为子链合成的引物,为DNA聚合酶提供3端12345(4)科研小组为了检测是否成功构建出融合基因,将反应后体系中的各种DNA分子进行电泳,结果如图2所示。则融合基因最可能是。图23号DNA分子12345解析(1)PCR体系中需要加入的物质有引物、模板链、耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)和dNTP等。PCR是一项体外扩增DNA的技术,利用PCR技术扩增目的基因,依据的生物学原理是DNA双链复制。(2)由于P2和P3两种引物存在互补配对序列,因此PCR1和PCR2不能在同一个体系中进行,理由是引物之间的结合会干扰引物和模板链的结合,从而影响PCR过程。(3)②过程不需要加入引物,两条母链的起始段位置的碱基序列即为引物,可以作为子链合成的引物,为DNA聚合酶提供3端。(4)PCR体系中存在融合和未融合的DNA分子,融合的DNA包括了2个DNA分子片段,其相对分子质量较大。根据电泳图可知,3号DNA分子的相对分子质量最大,因此3号DNA分子最可能是融合基因。12345123455.(2023·湖北模拟)玉米是我国乃至全球总产量最高的粮食作物,玉米植株一般为雌雄同株异花,同时也存在只有雄花序的雄株和只有雌花序的雌株。玉米的性别由独立遗传的两对等位基因(E/e和T/t)控制;其中E和T同时存在时,表现为雌雄同株异花;仅有T而没有E时,表现为雄株;t隐性纯合时,表现为雌株。(1)选取雌雄同株纯合子和雌株进行杂交,获得F1后自交得到F2。若F2中不出现雄株,则亲本的基因型分别为;若F2中出现3/16雄株,则亲本的基因型分别为。?(2)若一雄株与一雌株杂交,子代中雌株占1/2,则亲本可能的基因型有(写出两种基因型组合)。?EETT、EEttEETT、eetteeTt×Eett或eeTt×eett或eeTt×EEtt(3)培育抗除草剂玉米可有效降低玉米种植中的劳动总量。草甘膦是目前世界上使用最广泛的除草剂,EPSPS基因是常用的抗草甘膦基因。①EPSPS基因某条链的末端序列如下图:图1采用PCR技术获取和扩增EPSPS基因时,所需要的两种引物序列分别为(标出5和3端)。5
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