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考点2组成细胞的无机物
课题:4.3酵母细胞的固定化
【学习目标】
1.说出固定化酶和固定化细胞的作用原理;了解利用固定化酶技术生产高果糖浆的实例
2.说出固定化酶在生产实践中的优点;了解固定化酶和固定化细胞的方法及二者的联系与区别
【新课导学】
1.能将葡萄糖转化为果糖的酶是______________。
2.固定化酶技术使用的反应柱上的孔应满足酶颗粒________通过,反应溶液________通过,若
反应颗粒过大则不能通过。
3.固定化酶和固定化细胞技术是利用________或________方法将酶或细胞固定在一定空间内的
技术,包括________、______________和______________。其中细胞多采用__________固定化,而
酶多采用__________和________固定化。
4.用包埋法固定化细胞,即将微生物细胞均匀地包埋于____________________中。常用的包埋
微生物的载体有________、________、________、________和__________等。
5.活化就是让处于______状态的微生物重新恢复正常的生活状态。
6.制备固定化酵母细胞需要的试剂是________、__________和__________。
7.固定化酶和一般酶制剂的主要区别是_____________________________________。
【知识点解读】
知识点一高果糖浆
1.定义
高果糖浆是指果糖含量在42%左右的糖浆(果糖浆)。作为蔗糖替代品,高果糖浆具有甜度高,
但又不像蔗糖那样易诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病等,对人类健康更有益。
2.高果糖浆的生产原则
以葡萄糖为原料,在葡萄糖异构酶的作用下,将葡萄糖转化为其同分异构体—果糖,而葡萄糖
则是由淀粉制得的。
3.制备过程
(1)含淀粉的浆液在α淀粉酶的作用下形成糊精(其中含有大量麦芽糖)。
(2)糊精经过糖化酶(麦芽糖酶)的作用,形成葡萄糖。
(3)在葡萄糖溶液中加入葡萄糖异构酶,分子结构发生异化,形成果糖,这一过程叫葡萄糖的异
构化。此时果糖转化率并不高,一般为42%~45%。
(4)深加工,将葡萄糖和果糖的混合物分开,进一步使葡萄糖发生异构化,并反应多次,可使混
合物中果糖含量高达70%~90%,成为真正的高果糖浆。
知识点二固定化酶及固定化细胞
1.概念
固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法,将酶或细胞固定在一定空间内的技术。
2.固定化技术的优势
固定化酶和固定化细胞,将酶或细胞固定在不溶于水的载体上,使酶或细胞可以直接与反应物
接触,充分发挥其催化功能,又能与产物分离,被反复利用,还能在一定程度上避免高温、强酸、
强碱和有机溶剂对酶活性的影响,以提高催化效率,降低生产成本,提高产品质量。
3.固定化技术的固定方法:包埋法、化学结合法和物理吸附法。
(1)包埋法
包埋法是指将酶包裹在多孔的载体中,如将酶包裹在聚丙烯酰胺凝胶等高分子凝胶中,或包裹
在硝酸纤维等半透性高分子膜中。
(2)化学结合法
化学结合法是指将酶分子相互结合,或将其结合到纤维素、琼脂糖、离子交换树脂等载体上的固定
方式。工艺简便及条件温和是其显著特点,其载体选择范围很大,涉及天然或合成的无机、有机高
分子材料,其过程可同时达到纯化和固定化,酶失活后可重新活化,载体可以再生。
(3)物理吸附法
物理吸附法是指将酶吸附到固体吸附剂表面的方法,固体吸附剂多为活性炭、多孔玻璃等。
4.酶和细胞的固定不同
在实际应用中,酶更适于用化学结合和物理吸附法固定,这是因为酶分子小,容易被多孔性物
质吸附和更适合与化学物质结合,而容易从包埋材料中漏出,而细胞个体大,难以被吸附和与化学
物质结合,因而多采用包埋法,就是将微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中,常用的
载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维和聚丙烯酰胺等,最常用的是海藻酸钠。固定化细胞操
作更容易,对酶活性的影响更小,可以催化一系列的反应,容易回收等,但是由于大分子物质难以
自由通过细胞膜,因此固定化细胞的应用也受到限制。
知识点三制
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