鸡新城疫抗体检测-禽类实验室诊断技术课件.pptVIP

鸡新城疫抗体的检测（HA-HI实验）;三、实验材料;1%红细胞悬液制备;四、实验方法与步骤;抗原稀释倍数;3、加1%的鸡红细胞悬液。用微量移液器向1~12孔各加1%红细胞悬液50微升。

4、置于微量振荡器上，振荡1分钟。

5、结果观察室温静置15~20分钟后观察结果。

;结果观察：

方法1：从平面看，红细胞为一圆点沉于孔底表明未被病毒凝集；若红细胞铺平孔底，凝成均匀薄层，表明被病毒凝集。如下图:;方法2：将反应板倾斜45度，红细胞沿着倾斜面向下呈线状流动者，表明未被病毒凝集；倾斜后不流动，表明被病毒所凝集。如下图:;6、判定结果;配制4单位抗原时，抗原应稀释的倍数=凝集价/4

例：上图抗原凝集价为28，也就是说在第8孔中病毒的含量为1个凝集单位，那么第6孔中病毒的含量为4个凝集单位。则4单位抗原应将原抗原作26（64）稀释。即取0.1毫升抗原，加入6.3毫升生理盐水。;四、实验方法与步骤;血清稀释倍数;3、加4单位抗原1~12孔各加25微升。

4、振荡静置置于振荡器上，振荡1分钟，室温静置15~20分钟。

5、加1%的鸡红细胞悬液用微量移液器向1~12孔各加1%红细胞悬液25微升。

6、观察结果置于振荡器上，振荡1分钟。室温静置20~25分钟后观察结果。;结果观察：

;反应板倾斜45度角观察;7、判定结果;上图，血清抗体效价依次为8㏒2、7㏒2、8㏒2、9㏒2、8㏒2、7㏒2、7㏒2、6㏒2。;（2）判定标准：

一般认为鸡的免疫临界水平为：成鸡1：25或5㏒2

雏鸡1：26。

鸡血清的凝集抑制价，全部高于1：26可适当推迟新城疫免疫时间，全部低于1：24以下，应马上进行新城疫疫苗接种。

鸡群的血凝抑制抗体水平以抽检样品的平均值来表示。如某鸡群抽检10份样品中，血凝抑制价（㏒2）为8的有3份，7的5份，6的2份。它们的平均值为：

（8×3+7×5+6×2）÷（3+5+2）=7.1

;（4）大型鸡场抽样率不低于0.1%~0.5%；小型鸡场抽样率为1~2%。

（5）鸡群接种新城疫疫苗后2~3周测定血清中的血凝抑制抗体效价，若提高2个滴度以上，表示鸡的免疫应答好，疫苗接种成功。;五、注意事项;五、注意事项