心脑缺血的研究方法.pptVIP

心脑缺血研究进展

（一）缺血模型的建立

;;1.实验动物的选择;;;(2)猫、狗

这些动物属于哺乳纲的食肉目。猫、狗的脑皮层较发达,脑内各结构的发达程度和各部分比例与人脑较为接近,可同时对脑的不同部位做多次检查,适用于大脑皮层定位和观察各种反射的研究;但它们的脑血管走行及脑的血供与人脑差异较大。

猫脑的大部分血液由颈总动脉通过颈动脉网与脑底动脉吻合来供应。

狗的颈内-外动脉间有异常丰富的吻合网,脑可以通过许多侧枝循环得到血液供应。因此它们对血

流阻断具有较强的耐受力,使其单根颅内动脉阻塞难以形成稳定的脑梗死灶。

;(3)家兔

为哺乳纲的兔形目。其颅内主要供血动脉为颈内动脉,且颅内外血管间吻合网少,大脑中动脉主干阻断后,其它侧枝循环对缺血区脑组织的代偿性供血作用小,有利于脑梗死模型重复、稳定的建立。

但兔大脑皮层部分不发达,皮层薄,沟回较少,在制作皮层梗死时效果不够理想。并且约10%的家兔具有两支中动脉,阻断其复制脑缺血时应予注意。

(4)猪

猪和人在解剖、生理、营养和新陈代谢等方面有很大的相似性,是研究人类疾病的重要动物模型。

但有学者提出猪脑血管动-静脉吻合网丰富,侧枝循环较多,不利于脑梗死模型重复、稳定的建立。因此,它较少用于脑缺血,而主要用于冠心病等心血管疾病方面的研究。

;(5)啮齿类

目前大多数实验室选择啮齿类动物作为研究对象,尤其是大鼠和沙土鼠应用较多。原因为:

①大鼠品种多（SpragueDawleyrat,SD大鼠;Wistar大鼠）,成本低,能够为动物保护者所接受;

②种系纯,脑血管解剖和生理机能相似,梗死部位相对容易控制,实验重复性好;

③抗感染能力强,存活时间长,利于脑缺血后急性、亚急性和慢性相关病理改变过程的研究;

④有关系列大鼠的生理、药理和生化方面的实验资料可供分析比较;

⑤沙土鼠缺乏后交通动脉,闭塞一侧或两侧颈总动脉即可复制效果明显的同侧或双侧脑缺血模型。

;;

3.麻醉剂的选用

;;4.血糖浓度的影响

;缺血模型的复制;??栓形成及栓塞模型的实验方法

血栓形成及栓塞是危害人类健康的常见多发病。在探索这类疾病的病因发病过程中，动物模型的建立是不可少的手段之一，尤其在临床治疗学方面的应用更具有重要的地位。因此，本文将一些有关血栓形成及栓塞的方法学作一综合介绍，以供参考。

;一、外周血管血栓形成模型的复制方法

二、器官血栓形成及栓塞模型的复制方法

三、栓塞模型

?

;;;一、外周血管血栓形成模型的复制方法

（一）实验性动脉血栓形成

1．动脉吻合法：在麻醉大鼠颈部切口，分离20mm长的左颈总动脉。用动脉夹夹住其远端，继而夹住近端，于两夹之间切断动脉，生理盐水冲洗后，在手术显微镜下行动脉吻合术。当缝合第6或第7针时，自股静脉注入药物。缝合完毕后移去远端夹子，待反流性出血止住（2~3分钟），便移去远端夹子，血流能顺利通过吻合处即可。30分钟后，再次夹住动脉，用10%缓冲甲醛复盖固定，处死动物后取样本作组织学检检（连续切片，厚7μ）。用含100个小方格的目镜，按下式测量血栓形成百分率：

血栓所占的格子数

血栓形成率（%）=—————————×100

管腔内总的格子数;

2．电刺激法：分离大鼠一侧颈总动脉15mm长，用

两个不锈钢电极轻轻托起动脉，以1.5mA电流刺激7.5分

钟。用稳压器使电流保持恒定。电热变阻温度计一直与

动脉头端接触，从而连续记录血管的表面温度。也可用

半导体点温计间段测量血管表面温度，伤口附近用小塑

料而遮盖以免受组织温度的影响。从刺激开始至温度突

降的时间即血小板血栓形成使动脉堵塞的时间（OT），

用于药物效力分析，并作组织学检查。

本实验若用家兔进行，则全过程以压力换能器监测

血压、电磁流量计测其血流量，持续刺激120分钟或至

动脉血流停止为止。

;;3．动脉袢法：将20cm长的聚乙烯管（内径1mm，外径2mm）置于热水中折成袢状，并扎线以固定。用时剪去两端，硅化后灌满肝素即可使用。

在麻醉大鼠左腹部备皮，行左旁正中切口，长3cm，分离肾动脉至髂腰动脉一段，于精索内动脉和髂腰动脉处上夹；分别将动脉袢的两端插入腹主