兽医药理学实验.pptVIP

实验仪器、设备仪器:注射器，针头，天平，鼠笼。药物:四氯化碳、硫喷妥钠实验内容给健康小白鼠注射四氯化碳（0.1mL/10g)，造成肝损伤，后用0.3%硫喷妥钠注射(0.15mL/10g)，与健康小白鼠对照，比较它们麻醉出现及维持的时间的不同；解剖所有小白鼠，分别观察它们肝和肾的病理变化，并与健康小白鼠比较。实验记录肝脏损伤对药物作用的影响鼠号体重（g）硫喷妥钠剂量（mL）注射时间麻醉开始时间麻醉维持时间健康鼠肝损鼠注意事项“麻醉开始时间“为小鼠从腹腔注射硫喷妥钠溶液后至翻正反射消失时间；“麻醉消失时间”为从翻正反射消失至翻正反射恢复的时间。实验六药物敏感性实验学习内容药物敏感实验——纸片法定量药敏实验——试管二倍稀释法学习要求掌握两种药物敏感实验的原理、方法及注意事项。抗菌药物敏感性试验（AST，简称药敏试验）:用于测试抗菌药物在体外对病原微生物有无抑制作用。常用最低抑菌浓度（MIC）表示，即体外能够抑制细菌生长的最低药物浓度。通常根据MIC结合常用剂量时体内该药所能达到的血药浓度，划定细菌对各种抗生素敏感或耐药的界限，给出S（敏感）、I（中介）、R（耐药）等定性的结果，方便临床用药。检测病原菌对各种抗生素的敏感性，指导临床合理用药。用于流行病学调查及院内感染的监控，控制和预防耐药菌株的流行。为经验用药提供参考依据。方法:扩散法（纸片法）、稀释法（有琼脂稀释法和液体稀释法）药敏纸片的人工制作定性滤纸用打孔器打成直径6mm的圆片,每100片放入一小瓶中,160℃干热灭菌1---2小时,或用高压灭菌（6.8kg30min）后在60℃条件下烘干。（此应提前做好）抗菌药物的浓度（指有效药物浓度）

青霉素200U/ml其它抗菌药物1000ug/ml

磺胺类药物10mg/ml中草药制剂1g/ml

庆大霉素4万单位/ml,稀释为1000单位/ml。（临床上可按照药品使用说明书,如上面标明5克本品可拌50千克饲料,其换算方法为l克本品可拌10千克饲料,也就是1克本品拌l0000克饲料,相当于药品浓度为l克本品加l0000毫升蒸馏水。）用无菌操作法将欲测的抗菌药物溶液1ml，加入100片纸片中，置冰箱内1—2小时，用下列方法烘干:培养皿烘干法:将浸有抗菌药液的纸片摊平在培养皿中，于37℃的温箱内保持2--3小时即可干燥，或放在无菌室内过夜干燥。将制好的各种药物纸片装入无菌小瓶中，置冰箱内保存备用。并用标准敏感菌株做敏感性实验，记录抑菌环的直径。干燥的药敏纸片可保存6个月。使用前用标准的敏感菌株做药物敏感实验，若抑菌环比原来小，则表明该纸片已失效。纸片法每组约7-8个平皿（每人1个）,每个平皿约20毫升琼脂培养基,即约200ml。按照每组500毫升琼脂培养基、100毫升肉汤培养基准备。每平皿约4张纸片,每班约240张以上。将琼脂培养基熔融后,每个平皿倒入约20毫升,晾干后,用玻棒蘸含菌棉球（玻棒、棉球均事先消毒）涂抹均匀后晾干。用镊子夹纸片,每个平皿贴4张纸片,要使纸片全部紧贴培养基。为保证均匀,可于平皿背部划出贴纸片点。36摄氏度培养过夜。测量宽度。试管稀释法每组2排试管，每排10支。共80支。将庆大霉素用肉汤稀释液成64微克/毫升。每班20毫升即可。挑选10支无菌试管编号1—10。无菌加入1.0毫升肉汤至第2到10管内。将64微克/毫升庆大霉素液体，分别加1.0毫升至第1.2管，将第2管混合后取1.0毫升至第3管，依次至第9管，再从第9管取1.0毫升丢去，第10管不加抗生素作阳性对照。试管稀释法另准备肉汤管不加抗生素、细菌作阴性对照。第1—10管分别加入已增菌6小时的细菌浓度约为105-106cfu/ml菌液1.0毫升（细菌菌龄为16-18小时，McFarlandNo0.5管细菌浓度1.5×108cfu/ml，然后用用肉汤1:200稀释）。培养和结果判读:35℃培养16-24小时，肉眼观察有无细菌生长。阳性可见混浊生长，阴性可见澄清。最终各试管庆大霉素浓度:321684210.50.250微克/毫升实验七磺胺类药物内服给药后的血中药物浓度测定目的了解磺胺嘧啶非血管内一次给药后血药浓度随时间变化的规律。原理已知磺胺嘧啶等磺胺类药物在酸性环境下其苯环上的氨基（—NH2）将被离子化而生成铵类化合物（—NH3+）。后者与亚硝酸钠反应可发生重氮化反应进而生成重氮盐（—N＝N+—）。该化合物在碱性条件下可与麝香草酚生成橙黄色化合物。在525nm波长下比色,其光密度与磺胺嘧啶的浓