细菌与噬菌体的遗传重组分析.ppt

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三、噬菌体遗传的研究方法获得突变株:处理营养期细菌或者游离噬菌体四类突变株:1)寄主范围突变株(hostrangemutant)2)噬菌斑(plaquemutant)3)温度敏感性:野生型:37?C、43?C均可繁殖突变型:43ts:仅37?C繁殖4)溶菌酶:e+?e第64页,共84页,星期六,2024年,5月1)寄主范围突变株(hostrangemutant)寄主范围:指噬菌体感染和裂解的菌株范围。某种噬菌体只能侵染某一种菌的个别菌系,突变后寄主范围变宽或变窄。T2:h+噬菌体:只侵染E.coliB株;h突变株:E.coliBB/2第65页,共84页,星期六,2024年,5月2)噬菌斑突变株(plaquemutant)噬菌斑形状:噬菌斑的大小、边缘清晰度、透明程度。例如:T噬菌体rAr1r+?r(rapidlysis)rBr13(噬菌斑小、边缘模糊)(速溶型,噬菌斑大、边缘清晰)rCr7m+?m小型(minute)c+?c透明(clear)t+?t半透明(turbid)第66页,共84页,星期六,2024年,5月2、杂交试验-双重感染

第67页,共84页,星期六,2024年,5月(1)E.ColiBE.ColiB+B/2二点测验第68页,共84页,星期六,2024年,5月基因型噬菌斑h+r+半透明、小h-r-透明、大h+r-半透明、大h-r+透明、小重组值=×100%重组型亲型1+21+2+3+4第69页,共84页,星期六,2024年,5月第70页,共84页,星期六,2024年,5月rb-rcrb-hh在中间rc-h第71页,共84页,星期六,2024年,5月(2)三点测验第72页,共84页,星期六,2024年,5月第73页,共84页,星期六,2024年,5月3、重组测验第74页,共84页,星期六,2024年,5月1955年,美国的S.Benzer(本泽)用大肠杆菌T4噬菌体作为材料,研究快速溶菌(rapidlysis)突变型rⅡ的基因精细结构表4-1T4的突变型rⅡ和野生型rⅡ+在不同菌株上的噬菌斑类型不同大肠杆菌菌斑平板上的表型BK(λ)S野生型rII+小噬菌斑小噬菌斑小噬菌斑突变型rII大噬菌斑无噬菌斑(致死)小噬菌斑第75页,共84页,星期六,2024年,5月第76页,共84页,星期六,2024年,5月第77页,共84页,星期六,2024年,5月4、互补测验第78页,共84页,星期六,2024年,5月互补作用:两个突变型细胞的两条同源染色体同处在一个杂合体细胞或局部合子时,野生型基因补偿突变基因的缺陷而使细胞的表型恢复正常的作用。否则,两种突变型一定具有相同功能损伤。互补测验(complementationtest)(顺反位置效应测验):比较顺式和反式构型的细胞,从而判断两个突变是否属于同一基因的测验——测验基因间是否互补。第79页,共84页,星期六,2024年,5月反式构型:两个突变分别位于两条同源染色体上的基因组合。顺式构型:两个突变位于同一个染色体上的基因组合。第80页,共84页,星期六,2024年,5月第81页,共84页,星期六,2024年,5月5、缺失作图第82页,共84页,星期六,2024年,5月点突变和缺失突变的区别:1、点突变是单个位点的突变,缺失突变是多个位点的突变;2、点突变可回

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