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电泳分离血清蛋白实验报告

篇一：醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白实验报告

前言

血清蛋白：

血清蛋白是血液中脂肪酸的携带者。当身体需要能量或

者需要建造材料时，脂肪细胞就把脂肪酸释放到血液中，脂

肪酸被血清蛋白获取，并被运送到需要的部位。

牛血清白蛋白的相对分子质量为10的4次方这个级别，

它不是一定的，是多聚物，有的地方测的70000，这就是一

个数据了。在做pcR的时候会用到它。

牛血清蛋白是血液的主要成分，分子量68kD。等电点

4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。仅含已糖和已糖胺，含脂

量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个

半胱氨酸组成17个二硫键，在肽链的第34位有一自由巯基。

白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。血

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液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、ph缓冲作用、载体作

用和营养作用。在动物细胞无血清培养中，添加白蛋白可起

到生理和机械保护作用和载体作用。

醋酸纤维薄膜电泳：

醋酸纤维薄膜电泳以醋酸纤维薄膜为支持物。它是纤维

素的醋酸酯，由纤维素的羟基经乙酰化而制成。它溶于丙酮

等有机溶液中，即可涂布成均一细密的微孔薄膜，厚度以

0.1mm—0.15mm为宜。太厚吸水性差，分离效果不好；太薄

则膜片缺少应有的机械强度则易碎。

应用醋酸纤维薄膜电泳操作简单、快速、廉价。已经广

泛用于血

清蛋白，血红蛋白，球蛋白，脂蛋白，糖蛋白，甲胎蛋

白，类固醇激素及同工酶等的分离分析中，尽管它的分辨力

比聚丙酰胺凝胶电泳低，但它具有简单，快速等优点。

特点：

1.（1）醋酸纤维薄膜对蛋白质样品吸附极少，无“拖

尾”现象，染色后背景能完全脱色，各种蛋白质染色带分离

清晰，因而提高了测定的精确性。

（2）快速省时。由于醋酸纤维薄膜亲水性较滤纸小，

薄膜中所容纳的缓冲液也较少，电渗作用小，电泳时大部分

电流是由样品传导的，所以分离速度快，电泳时间短，一般

电泳45—60min即可，加上染色，脱色，整个电泳完成仅需

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90min左右。

（3）灵敏度高，样品用量少。血清蛋白仅需2μl血清，

甚至加样体积少至0.1μl，仅含5μg蛋白样品也可得到清

晰的分离带。临床医学检验利用这一点，检测在病理情况下

微量异常蛋白的改变。

（4）应用面广。某些蛋白在纸上电泳不易分离，如胎

儿甲种球蛋白，溶菌酶，胰岛素，组蛋白等用醋酸纤维薄膜

电泳能较好地分离。

（5）醋酸纤维薄膜电泳染色后，经冰乙酸，乙醇混合

液或其它溶液浸泡后可制成透明的干板，有利于扫描定量及

长期保存。

2、醋酸纤维薄膜电泳与聚丙烯酰胺凝胶电泳相比，操

作简单，但分离效果不太好。如血清蛋白在醋酸纤维素薄膜

电泳中，只能分离出5—6条区带，而聚丙烯酰胺凝胶电泳

可分离出数10条区带。

一、实验目的

1.掌握电泳法分离血清蛋白质的原理；

2.掌握血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的操作方法。

二、实验原理

1.电泳：是指带电粒子在电场中向本身所带电荷相反的

电极移动的现象。

在一定ph条件下，不同的蛋白质由于具有不同的等电

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点而带不同性质的电荷，因而在一定的电场中它们的移动方

向和移动速度也不同，即它们的电泳迁移率不同，因此，可

使它们分离

2.影响电泳迁移率的因素：

内在因素：蛋白所带净电荷的量、蛋白的大小和形状

外界因素：电场强度、溶液的ph值、溶液的离子强度

和电渗现象

3.血清中各种蛋白质的等电点在ph4.0～7.3之间，在

ph8.6