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文件编号无菌室的使用与管理制第B版

XX-XX度

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无菌室的使用与管理制度

XX-XX

一、无菌室的使用

1、无菌室应保持清洁整齐，室内仅存放必须的检验用具如酒精灯、酒精

棉、打火机、镊子、接种针、接种环、玻璃铅笔等。不要放与检

测无关的物品。

2、室内检验用具及凳桌等保持固定位置，不随便移动。

3、每周用8消毒液水溶液擦拭工作台、门、窗、桌、椅及地面，然

4

后用有效氯浓度1000mg/L的溶液喷雾消毒空气，最后紫外灯杀菌

半小时。

4、定期检查室内空气无菌状况，细菌数应控制在10个以下，发现不符

合要求时，应立即彻底消毒灭菌。/无菌室无菌程度的测定方法：

取普通肉汤琼脂平板、改良马丁培养基平板各3个（平板直径均9厘

米），置无菌室各工作位置上，开盖曝露半小时，然后倒置进行培养，

测细菌总数应置37C温箱培养48小时；测霉菌数则应置27C

温箱培养5天。细菌霉菌总数均不得超过10个为。

5、无菌室杀菌前，应将所有物品置于操作之部位（待检物例外），

然后打开紫外灯杀菌30分钟，时间一到，关闭紫外灯待用。

6、进入无菌室前，必须于缓冲间更换消毒过的工作服、工作帽及工

作鞋。

7、操作应严格按照无菌操作规定进行，操作中少说话，不喧哗，

以保持环境的无菌状态。

8高压蒸汽灭菌：工作服、口罩、稀释液等，置高压杀菌锅内，一般采

用121C灭菌半小时，当然不同的培养基有不同的要求，应分别处理。

9、火焰灭菌：接种针、接种环等可直接火焰灭菌。

10、高温干燥灭菌：各种玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中

160C灭菌2小时。

11、一般消毒:无菌室内的凳、工作台、试管架、天平、待检物容器

或包装均无法进行灭菌，必须用其他方法进行消毒处理，采用8消

4

毒液擦拭消毒，工作人员的手也用此法进行消毒。

12、空气的消毒：开启紫外灯照射30—60分钟即可。

二、无菌室的准备工作使用方法

1、先进行无菌室空间的消毒，开启紫外灯30—60分钟。

2、检验用的有关器材，搬入无菌室前必须分别进行灭菌消毒。

3、操作人员必须将手清洗消毒，穿戴好无菌工作衣、帽和鞋，才能进

入无菌室。

4、进入无菌室后再一次消毒手部，然后才进行检验操作。

三、无菌室操作过程注意事项

1、动作要轻，不能太快，以免搅动空气增加污染；玻璃器皿也应轻

取轻放，以免破损污染环境。

2、操作应在近火焰区进行。

3、接种环、接种针等金属器材使用前后均需灼烧，灼烧时先通过内

焰，使残物烘干后再灼烧灭菌。

4、使用吸管时，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必须用洗耳球操作

5、观察平板时不好开盖，如欲沾取菌落检查时，必需靠近火焰区操

作，平皿盖也不能大开，而是上下盖适当开缝。

6、进行可疑致病菌涂片染色时，应使用夹子夹持玻片，切勿用手直接

拿玻片，以免造成污染，用过的玻片也应置于消毒液中浸泡消毒，然后

再洗涤。

7、工作结束，收拾好工作台上的样品及器材，最后用消毒液擦拭工作

台。

四、无菌室管理规定

1、无菌室地面