DB11T 960-2013 梅花鹿胚胎移植技术规程.docxVIP

ICS65.020.30B44

备案号:36785-2013DB11北京市地方标准

DB11/T960—2013

梅花鹿胚胎移植技术规程

Codeofpracticeonembryotransferinthesikadeer

2013-01-31发布2013-05-01实施

北京市质量技术监督局发布

I

DB11/T960—2013

目次

前言 II

1范围 1

2术语和定义 1

3供体鹿选择、超数排卵及配种 2

4手术法冲胚 2

5胚胎质量鉴定 3

6受体鹿移植 3

7记录 4

附录A（资料性附录）梅花鹿胚胎移植记录表 5

II

DB11/T960—2013

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由北京市农业局提出。

本标准由北京市农业标准化技术委员会归口。本标准由北京市农业局负责组织实施。

本标准起草单位：北京市畜牧兽医总站、中国农业大学。

本标准主要起草人：刘国世、蒋益民、薛水玲、王俊、史文清、朱士恩、云鹏、王梁、薛振华、任康、赵广华、商业、张鲁。

1

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梅花鹿胚胎移植技术规程

1范围

本标准规定了供体鹿选择、超数排卵及配种、手术法冲胚、胚胎质量鉴定、受体鹿移植方法和记录。本标准适用于梅花鹿的胚胎生产和移植。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1

供体鹿donor

在胚胎移植过程中提供胚胎的母鹿个体。

2.2

受体鹿recipient

在胚胎移植过程中接受胚胎的母鹿个体。

2.3

试情公鹿teasterdeer

用于母鹿发情鉴定,输精管结扎的公鹿。2.4

超数排卵multipleovulation

在母畜发情周期的适当时间，应用外源促性腺激素处理，使卵巢比自然发情时有更多的卵泡发育并排卵，也简称为“超排”。

2.5

阴道栓vaginalsuppository

一种内含孕酮、用特制的放置器将其放入阴道的同期发情装置。

2.6

胚胎移植embryotransfer

将体内、外生产的哺乳动物早期胚胎，移植到另一头同种的生理状态相同或相似的雌性动物生殖道内，使之继续发育成为新个体的技术。

2

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3供体鹿选择、超数排卵及配种

3.1供体鹿选择

体况良好、生殖机能正常，系谱完整、有种用价值且年龄在3～5周岁的成年母鹿。

3.2超数排卵

放置阴道栓（当天记为第0天）后第9天开始注射促卵泡素（FSH），每天注射两次间隔12h，早晚各1次，4天8次等量或减量注射。到第12～13天结束，共注射FSH320mg。第7次注射FSH时取出阴道栓。

3.3发情鉴定

阴道栓取出后24小时开始用试情公鹿每隔6h试情一次，每次持续0.5h～1h。母鹿稳定接受爬跨即为发情。

3.4配种

供体鹿发情后8h～12h麻醉，直肠把握人工授精配种。间隔8h～12h重复输精一次。每次输精冻精剂量为2支/头（每支冻精的有效精子数在1000万以上）。

4手术法冲胚

4.1冲胚器材、药品及试剂

4.1.1器材

套管针、冲胚管、注射器、肠钳夹、培养皿、手术刀、手术缝合针和缝合线、体式显微镜、恒温板等。

4.1.2药品及试剂

含0.3%胎牛血清的磷酸缓冲液（PBS）、胚胎保存液（Holding液）、青霉素、链霉素、石蜡油、麻醉药、解麻药等。

4.2冲胚

4.2.1术前准备

供体母鹿第一次配种后6d～7d手术法冲胚，母鹿术前禁食24h。

4.2.2麻醉与保定

术前进行全身麻醉。冲胚时将母鹿放于保定架，呈前低后高仰卧保定。

4.2.3术部消毒

术部位于腹部中线距乳房约4cm处。麻醉后的母鹿术部备皮，用温水清洗，5%碘酊和75%酒精消毒。

4.2.4手术方法

4.2.4.1冲胚在冲胚室内进行。

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4.2.4.2在腹部中线距乳房基部前约4cm处做一切口，然后将两侧子宫角和输卵管暴露，观察左右卵巢上的黄体发育情况并记录。

4.2.4.3在一侧子宫角基部用止血钳穿孔，插入冲胚管，由充气管注入5ml左右空气,使气囊封阻子宫腔；在子宫角和输卵管结合部的子宫角端插入套管针，拔出针芯，将装有PBS的50ml注射器接到套管针上，然