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蜡样芽孢杆菌实验活动风险评估报告

一、生物学特性

（一）种类和细菌分型

拉秧芽孢杆菌（Bacilluscereus），又称仙人掌杆菌，为芽孢杆菌属中的一种，是一种地方性、土壤生活的、革兰阳性、β溶血性的杆状细菌，有荚膜严格需氧或碱性厌氧。该属细菌的重要特性是少数几种能够产生对不利条件具有特殊抵抗力的芽孢。芽孢杆菌属可分为以下亚群：多粘芽孢杆菌、枯草杆菌（包括蜡样杆菌和地衣芽孢杆菌）、短芽孢杆菌和炭疽芽孢杆菌。与其它芽孢杆菌相同，蜡样芽孢杆菌会产生防御性的内芽孢。它们对外界有害因子的抵抗力强。

（二）来源

蜡样芽孢杆菌于1950年首次在挪威报告。它分布广，存在于土壤、水、空气，以及动物肠道等处，健康成人粪便带菌率为14.5%，淀粉或乳制品食品由于储存不当等原因造成污染的机会很高。在自然界分布广泛，在各种食品中的检出率也较高。

（三）传染性

本菌可引起人类食物中毒，以及多种肠外感染，属人畜共患病原菌。食品中污染蜡样芽孢杆菌在室温内（16~40℃）即易繁殖并产生肠毒素，往往是食品在食用前保存温度不当，放置时间过长，使污染在食品中的蜡样芽孢杆菌或残存的芽孢得以生长繁殖。人通过进食被蜡样芽孢杆菌污染的食物而感染，而细菌繁殖的结果是产生肠毒素，人食用含毒素的食物后会产生呕吐、腹泻等不良症状。

（四）传播途径

蜡样芽孢杆菌主要通过泥土、灰尘、昆虫、不干净的食具和食品从业人员等传播。引起中毒的食品常见为剩米饭、米粉、甜酒酿、凉拌菜、甜点心及乳、肉类食品。因为本菌不分解蛋白质，因此，食品在感官上无明显变化，无异味，很容易误事而发生中毒。

（五）易感性

人群普通易感，孕妇、老年、免疫功能低下者，胃肠道功能较差者为多发人群。

（六）潜伏期

腹泻性食物中毒：由腹泻肠毒素所致，潜伏期较长（一般为8~16h），平均病程为24h。呕吐型食物中毒：由呕吐肠毒素所致，潜伏期为1~5h，平均病程不超过10h。

（七）剂量—效应关系

蜡样芽孢杆菌是条件致病菌，引起食物中毒的感染量必须达到一定的程度，即食物中含菌量达106/g以上才能发病。

（八）致病性

蜡样芽孢杆菌会引起食源性疾病和机会性感染。在生长过程中产生多种酶和胞外毒性物质，在引起食物中毒时，腹泻毒素和呕吐毒素这两类肠毒素起主要作用。此外，蜡样芽孢杆菌也是外伤后眼部感染的常见病原菌。对于引起的全眼球炎，常需进行眼球摘除。对免疫功能低下或使用免疫抑制剂的人，本菌还可引起心内膜炎、败血症和脑膜炎等。

蜡样芽孢杆菌的繁殖体不耐热，该菌可产生引起人类中毒的肠毒素，不耐热的腹泻毒素可见于多种食品中，耐热的低分子呕吐毒素常在米饭类食品中形成。

（1）腹泻毒素是蜡样芽孢杆菌在对数生长期合成并释放的胞外毒素，由多组分蛋白质构成。有抗原性，不耐热，56℃min失活，对胰蛋白酶敏感。具有致实验动物肠襻液体积聚、坏死、皮肤血管通透性改变，致实验动物死亡等多种生物学活性。目前，认为其作用机制与大肠杆菌不耐热肠毒素相似。

（2）呕吐毒素是某些菌株在芽孢形成时产生的小分子多肽。无抗原性，对热、酸、碱稳定，对胰蛋白酶、胃蛋白酶有抗性，可引起实验动物呕吐。

（九）变异性

蜡样芽孢杆菌的变异性目前尚未有确证的资料可以证实。

（十）环境中的稳定性

蜡样芽孢杆菌兼性好氧。生长温度范围为20~45℃，10℃以下生长缓慢或不生长，50℃时不生长。

（十一）药物敏感性

对氯霉素、红霉素、庆大霉素等常用的13种抗生素敏感，但对青霉素、磺胺类和呋喃类等7种抗生素耐药。

（十二）消毒剂敏感性

在95%乙醇中生长良好，对1:50的84消毒液和臭氧等均不敏感；而紫外线照射30min、250mg/L健之素作用5min对其有较好的杀灭作用。

（十三）物理灭活

对干燥、紫外线较敏感，高压灭菌有较好的杀灭作用。蜡样芽孢杆菌耐热，其37℃16h的肉汤培养物的D80℃值（在80℃时使细菌数减少90%所需的时间）约为10~15min，使肉汤中2.4×107/mL细菌转为阴性需100℃20min。其游离芽孢能耐受100℃30min，而干热灭菌需120℃60min才能杀死该菌，在100℃下加热20min可破坏这类菌。

（十四）在宿主体外存活

蜡样芽孢杆菌体外培养的营养要求不高，生长温度为25～37℃，最佳温度为30～32℃。在肉汤中生长混浊，有菌膜或壁环，振摇易乳化。在普通琼脂上生成的菌落较大、灰白色、不透明，表面粗糙似毛玻璃状或融状，边缘常呈扩展状。

（十五）与其他生物和环境的交互作用

对外界有害因子抵抗力强，分布广，存在于土壤、水、空气，以及动物肠道等处。蜡样芽孢杆菌是典型的菌体细胞，有部分菌株能产生肠毒素。蜡样芽孢杆菌在自然界分布广泛，在各种食品中的检出率也较高，，往往是食品在食用前保存温度不当，放置时间过长，使污染在食品中的蜡样芽孢杆菌或残存的芽孢得以