人教版高考生物学一轮总复习精品课件 第10单元 生物技术与工程 第52讲 基因工程的基本工具与操作程序 (2).ppt

考向探究?素养提升考向一围绕DNA的粗提取与鉴定,考查科学探究1.下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是()A.新鲜猪血、菜花等动植物材料均可用于DNA的粗提取B.DNA不溶于体积分数为95%的冷酒精而溶于2mol/L的NaCl溶液C.在研磨植物细胞时加入研磨液是为了溶解细胞壁D.溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂后即呈蓝色B解析猪是哺乳动物,其成熟的红细胞中无细胞核,不含DNA,因此新鲜猪血不能用于提取DNA,A项错误;DNA不溶于体积分数为95%的冷酒精,但能溶于2mol/L的NaCl溶液,因此可用酒精进一步纯化DNA,B项正确;在研磨植物细胞时加入研磨液是为了破坏细胞壁,C项错误;溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂,沸水浴加热后,颜色呈蓝色,D项错误。考向二围绕DNA片段的扩增及电泳鉴定,考查科学探究2.大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后,拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上,静置一段时间,质粒分布在上清液中,利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物,电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述,正确的是()A.DNA溶于酒精,可用二苯胺试剂在沸水浴条件下鉴定DNAB.电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相同的电极移动的原理C.根据电泳结果,质粒上没有限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位点,而有限制酶Ⅲ的切割位点D.用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒,被染色的质粒还需要通过紫外灯照射才能看到结果D解析DNA不溶于酒精,可用二苯胺试剂在沸水浴条件下鉴定DNA,A项错误;DNA带负电荷,DNA在电场中会向着与它所带电荷相反的电极移动,B项错误;因为质粒的本质是环状的DNA,限制酶Ⅰ和Ⅱ处理后电泳只有一条条带,可能是该质粒上有一个切割位点,也可能没有切割位点,C项错误;用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒时,电泳结果中的这些条带通常需要在紫外线下观察和照射才能显示出来,因此需要紫外灯照射,D项正确。3.下图为利用PCR技术扩增特定DNA片段的部分示意图,图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。下列有关描述正确的是()A.利用PCR技术扩增目的基因时不需要解旋酶而需要耐高温的DNA聚合酶B.引物是子链合成延伸的基础,子链沿着模板链的5→3方向延伸C.从理论上推测,第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为15/16D.在第三轮循环产物中才开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段且占1/2A解析利用PCR技术扩增目的基因时不需要解旋酶,该过程中氢键的断裂是通过高温完成的,而子链延伸过程需要耐高温的DNA聚合酶,A项正确;耐高温的DNA聚合酶从引物3端开始延伸DNA链,即子链沿着模板链的3→5方向延伸,B项错误;DNA复制为半保留复制,DNA复制4次,共形成24个DNA,其中2个DNA含有母链和子链(引物A或引物B),(24-2)个DNA都含有子链(含有引物A和引物B),因此,第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为1/16,C项错误;第三轮循环共形成8个DNA,其中只有2个两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段,占比为1/4,D项错误。真题演练?领悟考情角度1基因工程的基本工具1.(2023·全国新课标卷)某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具,将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接,以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示。下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是()A.质粒和目的基因都用酶3切割,用E.coliDNA连接酶连接B.质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割,用T4DNA连接酶连接C.质粒和目的基因都用酶1和酶2切割,用T4DNA连接酶连接D.质粒和目的基因都用酶2和酶4切割,用E.coliDNA连接酶连接C解析E.coliDNA连接酶不能连接具有平末端的DNA片段,A项错误。质粒用酶3切割,目的基因用酶1切割,得不到相同的黏性末端,所以二者不能连接,B项错误。质粒和目的基因都用酶1和酶2切割,用T4DNA连接酶能将目的基因和质粒连接起来,且避免了目的基因和质粒的自身环化,所以效率最高,C项正确。酶4会破坏抗生素抗性基因,即标记基因,D项错误。2.(2023·湖北卷)用氨苄青霉素抗性基因(AmpR)、四环素抗性基因(TetR)作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒,构建基因表达载体(重组质粒),并转化到受体菌中。下列叙述错误的是()A.若用HindⅢ酶切,目的基因转录的产物可能不同B.若用PvuⅠ酶切,在含Tet(四环素)培养基中的