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消毒质量现场采样及检测方法采样及检测原则GB15982-1995医院消毒卫生标准规定:采样时间:消毒处理后,医疗活动前期间采样后尽快检测,送检时间≤6小时,若样品保存0—4℃,送检时间≤24h一、空气器材:9cm普通营养琼脂平板方法:平板暴露法(沉降法)一般情况:按GB15982-1995医院消毒卫生标准:布点方法:室内面积≤30m2,设内、中、外对角线三点,内外布点距墙壁1m;室内面积>30m2,设中央及四角5点,四点的布点位置距墙1m,暴露时间5min培养时间:48小时计算公式:细菌总数(cfu/m3)=50000N/(A×T)A:平板面积(cm2)T:平板暴露时间N:平均菌落数检出限:对于≤30m2房间,如果3块平板共长1个菌,则根据公式,计算结果为52.3报<53cfu/m3如果先四舍五入,保留一位小数,以平均菌量0.3计,结果是47.2,报<48cfu/m3数值的不同与在哪一步采取数字修约有关对于>30m2房间计算结果为31.4,报<32cfu/m3上述情况说明:平板沉降5分钟只能适用于卫生标准值高于检测限的空气采样,例如普通手术室,标准值≤200cfu/m3对于洁净度要求高的环境,该方法的最低检出限与评价标准不一致GB15928-1995规定Ⅰ类环境≤10cfu/m3怎么解决?延长采样时间洁净手术室:依据GB50333-2002检测二、物体表面1、采样液对于只清洁、未消毒的表面:无菌生理盐水消毒后的物体表面:根据使用消毒剂选择含相应中和剂的采用液2.采样方法5cm×5cm标准规格板棉拭采样≥100cm2;门把手等不规则物体表面:直接涂抹3、中和剂的选择中和剂中需要加硫代硫酸钠的:过氧化氢、过氧乙酸、二氧化氯、氧化还原电位水、臭氧、含氯消毒剂、碘和其他消毒剂要加卵磷脂和吐温80的:乙醇、洗必泰、季铵盐类、要加甘氨酸的:戊二醛、三氯生、对氯间二甲苯酚、要加皂基的:聚六亚甲基胍(若没有皂基,可将1%组氨酸、5%卵磷脂、10%吐温80加入D/E肉汤医院常用手消毒剂的中和剂举例:爱护佳(3M公司):2%卵磷脂4%吐温80百能牌免洗外科手消毒液:2%甘氨酸6%卵磷脂10%吐温80诗乐氏(含双氯苯双胍乙烷)、净手(氯羟基二苯醚):1%组氨酸4%卵磷脂6%吐温804、检测细菌总数:取1ml接种平皿金黄色葡萄菌:1ml接种9mlSCDLP液体培养基,36±1℃培养24h,血平板分离乙型溶血性链球菌:样品1ml接种1%葡萄糖肉汤沙门氏菌:按照GB4789.41ml加入增菌液中四、工作人员手1.采样液:无菌生理盐水适合只清洁,未用消毒剂的情况含相应中和剂的采样液适用于消毒后采样手卫生效果的监测方法WS/T313-2009《医务人员手卫生规范》附录B如果消毒后采样,需要用证实符合要求的中和剂怎样知道用何种中和剂?通过进货时查验产品的检验报告或进行中和剂鉴定试验2.采样方法被检人员五指并拢,用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子,在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面积约30cm2)并随之转动采样棉拭,剪去操作者手接触部位,将棉拭投入10ml采样液。检测方法:混匀器振荡20秒或用力振打80次,取1ml接种,36℃培养48小时。标准:卫生手消毒:监测的细菌菌落总数应≤10cfu/cm外科手消毒:监测的细菌菌落总数应≤5cfu/cm五.使用中消毒液1.采样时间:更换前,使用中的消毒液2.需要检测微生物污染情况的:采样液:含相应中和剂的营养肉汤,采样方法:取1.0ml消毒液加入9.0ml含中和剂的营养肉汤3.需要测定含量:另取干净、干燥的采样瓶直接取样采样量>100ml要求采样量满足检测需要。标准要求:使用中的消毒液污染的微生物≤100cfu/ml;不得检出致病性微生物使用中消毒液有效成分含量要求符合标识浓度六、内窥镜采样依据:内镜清洗消毒技术规范方法检测部位:内镜的内腔面用无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液,从待检内镜活检口注入,用15ml无菌试管从活检出口收集,及时送检,2小时内检测一般情况的中和剂
酸化水:0.5%硫代硫酸钠、0.5%吐温80戊二醛:1%甘氨酸、0.5%吐温80采样时注意事项:避免污染防止酒精灯火焰伤及内镜镜头操作一人难以完成,需要两人配合采样时最好标明内镜编
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