人教版高考生物学一轮总复习精品课件 第10单元 生物技术与工程 课时规范练53 基因工程的应用及蛋白质工程 (5).ppt

1233.(2024·广西适应性测试)PCR可用于扩增并检测DNA,但存在交叉污染或偏差等问题,而新研发的基于CRISPR/Cas12a系统的检测方法,可在低浓度样本中更灵敏,快速识别靶标DNA。该系统利用gRNA介导Cas12a蛋白能准确切割靶标DNA。同时切割荧光底物使其发出荧光,通过检测荧光强度确定靶标DNA含量,利用Cas12a检测靶标DNA的过程如下图所示。回答下列问题。123(1)根据图中信息可推测Cas12a作用于靶标DNA时,具有类似酶和酶的功能;gRNA识别靶标DNA,遵循的是原则。?(2)在构建表达Cas12a蛋白的载体时,通常是将Cas12a基因插入到lacZ基因内,使lacZ基因失活,从而失去催化无色底物显色的能力,Ampr为氨苄青霉素抗性基因。理论上通过含氨苄青霉素且不含无色底物的对应培养基培养,不能筛选到含有Cas12a基因表达载体的工程菌,判断的依据是。?在含氨苄青霉素且不含无色底物的对应培养基培养上长出的菌落,无论Cas12a基因是否成功导入都不会出现显色反应(3)荧光检测时,60min后三组荧光信号强度达到一致,原因是。?限制解旋碱基互补配对Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光的物质含量相同123(4)实验研究时,增加NTC组作对照的作用是;g-3+g-7组可更快检测出靶标DNA,原因是。?g-3+g-7组在介导Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光方面具有协同作用排除其他物质介导Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光123解析(1)根据图中信息可推测Cas12a作用于靶标DNA时,可以切割靶标DNA,并能解开靶标DNA,使其与g-3和g-7结合,所以Cas12a具有类似限制酶和解旋酶的功能;gRNA识别靶标DNA,遵循的是碱基互补配对原则。(2)在构建表达Cas12a蛋白的载体时,通常是将Cas12a基因插入到lacZ基因内,使lacZ基因失活,从而失去催化无色底物显色的能力,所以在含氨苄青霉素且不含无色底物的对应培养基培养上长出的菌落,无论Cas12a基因是否成功导入都不会出现显色反应。(3)荧光检测时,60min后三组荧光信号强度达到一致,原因是Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光的物质含量相同。(4)实验研究时,增加NTC组作对照的作用是排除其他物质介导Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光;g-3+g-7组可更快检测出靶标DNA,原因是g-3+g-7组在介导Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光方面具有协同作用。本课结束课时规范练53基因工程的应用及蛋白质工程必备知识基础练123456考点一基因工程的应用1.每年我国约30万人在器官移植等待的名单中,但仅有1万多人能获得器官移植的机会,供体来源不足是目前器官移植最大的问题。基因工程为器官移植提供了新的思路,如果能在猪的基因组中导入某种调节基因,抑制其抗原决定基因的表达,就可以结合克隆技术培育出不会引起免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。123456下列关于转基因克隆猪器官的叙述,错误的是()A.选用猪做克隆器官供体是因为其内脏构造、大小与血管分布和人的类似,且猪体内可导致人类疾病的病毒少B.该操作的核心步骤是基因表达载体的构建,需要用到限制酶、DNA连接酶两种工具酶C.调节基因导入的受体细胞取决于需要的器官类型,若需要移植肝脏,则受体细胞为肝细胞D.若要检测目的基因是否导入了受体细胞,可以利用PCR等技术进行检测C123456解析猪的内脏构造、大小、血管分布与人的极为相似,而且猪体内可导致人类疾病的病毒远远少于灵长类动物,A项正确;在构建基因表达载体时,首先会用一定的限制酶切割载体和含有目的基因的DNA片段,再利用DNA连接酶将目的基因片段拼接到载体的切口处,形成一个重组DNA分子,将目的基因导入动物细胞,受体细胞一般是受精卵,受精卵具有发育的全能性,肝细胞无法发育成完整的肝脏,因此不会选择肝细胞作为受体细胞,B项正确,C项错误;分子水平的检测,可以通过PCR等技术检测受体细胞DNA上是否插入了目的基因或检测目的基因是否转录出了mRNA,D项正确。1234562.(2023·广东汕头三模)如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径,下列有关叙述正确的是()A.分子运输车——载