人教版高中生物学选择性必修3生物技术与工程精品课件 第2章 细胞工程 第2节 第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体 (2).ppt

合作探究释疑解惑[问题引领]知识点一动物细胞融合技术1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同?提示:①利用灭活的病毒诱导是动物细胞融合常用的方法,植物体细胞杂交不用此方法。②在植物体细胞杂交过程中,首先要去除细胞壁,制备原生质体,而动物细胞无细胞壁,可直接诱导融合。③通过植物体细胞杂交技术可获得杂种植株,通过动物细胞融合技术只能得到杂交细胞或细胞产物。2.细胞融合的实质是什么?动物细胞融合完成的标志是什么?提示:细胞融合的实质是细胞核融合。动物细胞融合完成的标志是两个或多个细胞核融合为一个细胞核。3.培养液中存在A、B两种细胞,经诱导融合处理后,培养液中可能存在的融合细胞类型有哪些(只考虑两个细胞融合的情况)?哪种类型才是真正有意义的杂交细胞?提示:A—A融合细胞、B—B融合细胞、A—B融合细胞。其中A—B融合细胞才是真正有意义的杂交细胞。[归纳提升]1.灭活病毒诱导法的原理灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏它们的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。具体过程如上图所示。2.植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合培养条件营养物质(水、无机盐、蔗糖、氨基酸等)、激素(细胞分裂素、生长素等)及其他条件(无菌、适宜的温度和pH等)葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等以及血清等天然成分原理细胞膜的流动性、植物细胞的全能性细胞膜的流动性融合前处理用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理使组织分散成单个细胞后,诱导细胞融合比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合诱导融合的方法电融合法、离心法、聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法电融合法、PEG融合法、灭活病毒诱导法结果获得杂种植株获得杂交细胞,以生产细胞产品用途打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种等制备单克隆抗体等[典型例题]下图为细胞融合的部分过程,请据图回答下列问题。(1)从甲细胞和乙细胞到丙细胞的过程中,诱导动物细胞融合采用的方法中与诱导植物原生质体融合不同的是用处理。?(2)如果甲、乙是来自单倍体烟草的体细胞,那么它们已经用酶降解且脱掉了。该过程所用的酶可能是,由此形成的细胞经培养形成的细胞团称为。?(3)若将基因型为AaBB的番茄细胞与基因型为AAbb的番茄细胞融合,所形成细胞的基因型是。?(4)若将染色体组成为2A+XX的人细胞与染色体组成为2B+XX的鼠细胞融合,培育成的人—鼠细胞的染色体组成是。?答案:(1)灭活的病毒(2)细胞壁纤维素酶和果胶酶愈伤组织(3)AAAaBBbb(4)2A+2B+XX+XX解析:(1)诱导动物细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导法。(2)植物细胞有细胞壁,如果甲、乙是来自单倍体烟草的体细胞,那么它们已经用纤维素酶和果胶酶处理脱掉了细胞壁。植物体细胞杂交获得的杂种细胞,经脱分化形成愈伤组织。(3)若将基因型为AaBB的番茄细胞与基因型为AAbb的番茄细胞融合,所形成细胞的基因型是两种细胞基因型的累加,即AAAaBBbb。(4)细胞融合后的染色体组成是两种细胞染色体组成的累加。[问题引领]知识点二单克隆抗体及其应用1.单克隆抗体制备过程运用了哪些主要的动物细胞工程技术手段?提示:动物细胞融合技术和动物细胞培养技术。2.制备单克隆抗体时,为什么要选用经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞?提示:每个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体,但不能无限增殖;骨髓瘤细胞可快速大量增殖,却不能产生抗体。若将两种细胞融合在一起,则既能产生特异性抗体,又能迅速大量增殖。3.B淋巴细胞和骨髓瘤细胞经聚乙二醇处理后,培养液中存在哪几种细胞(只考虑两两融合)?提示:未融合的B淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、B—B融合细胞、瘤—瘤融合细胞、B—瘤融合细胞。4.在制备单克隆抗体的过程中需进行两次筛选,其目的分别是什么?最终筛选得到的细胞,怎样操作才能获得大量的单克隆抗体?提示:第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞,第二次筛选的目的是获得能产生所需单一抗体的杂交瘤细胞。体外培养和注射到小鼠腹腔内培养。[归纳提升]1.血清抗体与单克隆抗体的比较比较项目产生特点血清抗体由B淋巴(浆)细胞分泌产量低、纯度低、特异性差单克隆抗体由杂交瘤细