人教版高中生物学选择性必修3生物技术与工程精品课件 第1章 发酵工程 第2节 第2课时 微生物的选择培养和计数 (2).ppt

本课结束四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.探究目的(1)从土壤中分离出能分解尿素的细菌。(2)计算每克土壤样品中能分解尿素的细菌的数目。2.基础知识:只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基,可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。3实验设计合作探究释疑解惑[问题引领]知识点一微生物的选择培养1.下面是筛选分解尿素的细菌的选择培养基的配方,请分析并回答下列问题。KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000mL(1)在该培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质?提示:为微生物的生长提供碳源的是葡萄糖,提供氮源的是尿素。(2)分析该培养基的配方,该培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有,是如何进行选择的?提示:是。以尿素作为唯一氮源的培养基可以分离到能产生脲酶的微生物(即能分解尿素的微生物)。2.一种自养微生物与多种异养微生物混合在一起,如何将自养微生物选择出来?提示:用不含碳源的培养基进行培养,自养微生物可以利用空气中的CO2,而异养微生物不可以,能在不含碳源的培养基中生存的就是自养微生物。[归纳提升]1.选择培养的原理根据不同微生物的特殊营养需求或其对某化学、物理因素的抗性不同而制备培养基。这样的培养基允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物的生长,从而起到选择目的菌的作用。2.选择培养基的选择作用选择培养原理具体处理分离菌种利用营养缺陷型选择培养基进行的选择培养不加含碳有机物的无碳培养基分离自养型微生物无氮培养基分离固氮微生物利用微生物(目的菌)对某种营养物质的特殊需求,使该营养物质成为某类微生物的唯一供给者石油作为唯一碳源的培养基分离出能降解石油的微生物尿素作为唯一氮源的培养基分离能分解尿素的微生物选择培养原理具体处理分离菌种在完全培养基中加入某些化学物质,利用加入的化学物质抑制某些微生物生长或利于某些微生物生长加入青霉素等抗生素能分离出酵母菌和霉菌等真菌,同时抑制细菌的生长加入高浓度的食盐分离金黄色葡萄球菌利用培养条件进行的选择培养在高温环境中培养分离耐高温的微生物将培养基pH调至较低水平分离耐酸的微生物在无氧环境中培养分离厌氧微生物和兼性厌氧微生物[典型例题]下表所示为某微生物培养基的配方,下列有关叙述错误的是()成分含量NaNO33gK2HPO41g琼脂15gMgSO4·7H2O0.5gFeSO40.01g葡萄糖30g青霉素0.1万单位H2O定容至1000mLA.依物理性质划分,该培养基属于固体培养基;依用途划分,该培养基属于选择培养基B.由培养基的成分可知,该培养基所培养微生物的同化作用类型是异养型C.该培养基中添加的青霉素满足了微生物生长对特殊营养物质的要求D.若用该培养基分离能分解尿素的细菌,应除去青霉素和NaNO3,并应加入尿素答案:C解析:由题表可知,该培养基中含有凝固剂——琼脂,因此从物理性质上看属于固体培养基;该培养基中含有青霉素,因此从用途上看属于选择培养基,A项正确。培养基中加入的葡萄糖属于有机碳源,因此所培养微生物的同化作用类型是异养型,B项正确。培养基中添加的青霉素是为了筛选具有青霉素抗性的微生物,C项错误。若用该培养基分离能分解尿素的细菌,应以尿素为唯一氮源,且青霉素能抑制细菌的生长,故应除去培养基中的青霉素和NaNO3,并加入尿素,D项正确。[问题引领]知识点二微生物的数量测定1.在用稀释涂布平板法对微生物进行计数时,统计菌落数目的理论依据是什么?提示:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。2.在稀释涂布平板法中,为何需要涂布3个平板?提示:作为重复实验,统计时取平均值,以减少偶然因素对实验结果的影响,增强实验结果的说服力。3.微生物数量的测定为什么用稀释涂布平板法,不用平板划线法?提示:平板划线法只有最后一次划线的末端才会形成只由一个微生物形成的菌落,最开始划线的区域微生物很可能长成一片,导致无法计数。此外,灼烧接种环的时候也会杀死一部分微生物。稀释涂布平板法是按照一定浓度梯度稀释样品,当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。4.稀释涂布平板法和显微镜直接计数法对微生物计数产生的实验误差如何?试分析原因。提示:稀释涂