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亲权鉴定技术规范
1范围
本标准规定了我国法医DNA实验室进行亲权鉴定所必须遵循的技术要求。本标准适用于从事亲权鉴定的DNA实验室,不适用于大通量数据库的比对。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本部分的条款。凡是注明日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可适用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注明日期的引用文件,其必威体育精装版版本适用于本部分。
CNAS-CL01:2006检测和校准实验室认可准则GA/T382-2002法庭科学DNA实验室规范
GA/T383-2002法庭科学DNA实验室检验规范
3术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
3.1亲权鉴定ParentageTesting
亲权鉴定是通过对人类遗传标记的检测,根据遗传规律分析,对个体之间血缘关系的鉴定。3.2三联体亲子鉴定ParentageTestingofTrios
被检测男子、孩子生母与孩子的亲子鉴定。
3.3二联体亲子鉴定ParentageTestingofDuos被检测男子与孩子的亲子关系鉴定。
注:被检测女子与孩子的亲子关系鉴定也属于二联体亲子鉴定,但本标准界定的是被检测男子与孩子的亲子关系鉴定。
3.4祖孙亲缘关系鉴定KinshipAnalysisofGrandparentsandGrandchildren
祖孙亲缘关系鉴定是通过对人类遗传标记的检测,根据遗传规律分析,对有争议的祖父母与孙子女血缘关系的鉴定。
3.5遗传标记GeneticMarker
具有多态性的基因座。用于亲子鉴定的遗传分析系统由一定数量的遗传标记组成,常用的有常染色体短串联重复序列(STR)、Y染色体短串联重复序列(Y-STR)、X染色体短串联重复序列(X-STR)。
3.6排除概率PowerofExclusion,PE
对于不是孩子生父的随机男子,遗传分析系统具有的排除能力。它是遗传分析系统效能的评估指标。
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3.7亲权指数PaternityIndex,PI
亲权指数是亲权关系鉴定中判断遗传证据强度的指标。它是两个条件概率的似然比率:
PI=
概率检测到当事人的遗传表型假设被检测男子是孩子的生物学父亲
概率(检测到当事人的遗传表型假设一个随机男子是孩子的生物学父亲
4检验程序
4.1采样要求
对于三联体,采集被检测男子、孩子生母与孩子的样本用于检验;对于二联体,采集被检测男子与孩子的样本用于检验;对于祖父母与孙的鉴定案例,则采集被检测祖父、祖母、孩子生母与孩子的样本用于检验。样本一般是血液(斑)或口腔拭子(唾液斑),其它人体生物学材料如带毛囊毛发、羊水、组织块、精液(斑)等亦可作为亲权鉴定的样本。样本必须分别包装,注明被采样人姓名、编号、采样人、采样日期等,置于冰箱冷藏或冻存。
采样时,需要填写采样单,写明委托方名称、采样日期、采样类型、被采样人姓名、性别、称谓、出生日期、证件号码等,并拍摄被采样人照片,由被采样人在采样单上留下右手拇指或食指指纹(婴儿可留右脚拇趾印),并签名确认(婴幼儿的姓名由其监护人代签)。
对于接受了外周血干细胞移植的当事人,应避免采集其血样作为检验材料,宜取其口腔拭子(唾液斑)或毛发进行检验。
4.2DNA提取
采用Chelex-100法(见如下步骤)或其它经过了验证的方法抽提DNA。若不经过DNA抽提而直
接将检材用于PCR,方法必须经过验证。4.2.1从血样中提取DNA:
a)在1.5mL离心管中加1mL纯水,然后加入血样(不少于3μL血液或9mm2血斑),小心混匀;放置30min,间歇振荡;
b)10,000-15,000r/min离心2-3min;小心移去上清液。若样品为血斑,则保留载体;
c)沉淀中加入5%Chelex100(100-200目)200μL,56℃保温30min;
d)高速振荡5-10s;沸水浴8min;
e)高速振荡5-10s;10,000-15,000r/min离心2-3min,取上清液用于扩增反应;2-8℃保存或冻存剩余DNA。
4.2.2从口腔刮拭物样本中提取DNA:
a)用牙签刮拭口腔粘膜,将其放入1.5mL离心管内,加入200μL5%Chelex(100-200目);搅动,使细胞脱落;
b)56℃保温15-30min;
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c)高速振荡5-10s,沸水煮8
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