紫外可见分光光度法课件(共37张精选课件).pptx

紫外可见分光光度法PPT;第十章紫外-可见分光光度法;1．电磁辐射与电磁波谱、物质对光的选择性吸收等基础知识。

2．紫外-可见分光光度法的基本原理。

3．紫外-可见分光光度计的主要部件、仪器类型、测量条件的选择。

4．定性和定量分析方法。;;第一节光谱分析法概述;二、物质对光的选择性吸收;;光

学

分

析

法;紫外-可见分光光度法（UV-Vis)：研究物质在紫外（200-400nm）-可见光（400-760nm）区分子吸收光谱的分析方法。;（一）透光率与吸光度

当一束平行单色光照射到任何均匀、非散射的介质（固体、液体或气体），例如溶液时，光的一部分被介质吸收，一部分透过溶液、一部分被器皿的表面反射。如果入射光的强度为I0，吸收光的强度为Ia，透过光的强度为It,反射光的强度为Ir则它们之间的关系为

I0＝Ir+Ia+It;;;（三）吸光系数

当溶液浓度c的单位为mol/L，液层厚度的单位为cm时，K称为摩尔吸光系数，用ε表示，单位为L/(mol·cm)

当c的单位为g/100ml，L的单位为cm时,K用表示，称为吸光系数，其单位为单位为ml/(g·cm)。

与ε间的关系：

;二、吸收光谱;1、理解掌握朗伯－比尔定律的意义及应用。

3．化学变化所引起的偏离

显示方式主要有透光率与吸光度，有的还能转换成浓度、吸光系数等显示。

常用的有光电管和光电倍增管，近年来使用光多道检测器，具有快速扫描的特点。

I0＝Ir+Ia+It

第四节定性和定量分析方法

1、理解掌握朗伯－比尔定律的意义及应用。

例：维生素B12的水溶液在361nm处的为207，现将其盛于2cm的吸收池中，测得溶液的吸光度是0.

可见、紫外、红外分光光度法

如果物质选择性地吸收了某些波长的光，这种物质的颜色就由它所反射或透过光的颜色来决定，即物质呈现的颜色是其吸收光颜色的互补色。

二、分光光度计的类型

如果物质选择性地吸收了某些波长的光，这种物质的颜色就由它所反射或透过光的颜色来决定，即物质呈现的颜色是其吸收光颜色的互补色。

朗伯定律A=K1L;;（一）光源

在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。

???见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320-2500nm。

紫外区：氢、氘灯。发射185-400nm的连续光谱。

;远紫外;（二）单色器;;;（三）吸收池;（四）检测器;信号处理与显示器的作用：

将检测器检测到的电信号经过放大以某种方式将测量结果显示出来。显示器常用的有电表指示、数字显示、荧光屏显示、曲线扫描及结果打印等。显示方式主要有透光率与吸光度，有的还能转换成浓度、吸光系数等显示。;二、分光光度计的类型;第三节紫外-可见分光光度计

单色器的作用：

三、偏离朗伯-比尔定律的主要因素

05mol/LHCl溶液制成每lml含2mg的溶液，在lcm吸收池中，于310nm处测其吸光度A值。

3．紫外-可见分光光度计的主要部件、仪器类型、测量条件的选择。

（一）比较吸收光谱的一致性

例如：丙酸睾丸素和甲基睾丸酮在无水乙醇中的最大吸收波长λmax相同，都是240nm，但在该波长处的不同，前者为460，后者为540，据此可加以区别。

显示器常用的有电表指示、数字显示、荧光屏显示、曲线扫描及结果打印等。

如果物质选择性地吸收了某些波长的光，这种物质的颜色就由它所反射或透过光的颜色来决定，即物质呈现的颜色是其吸收光颜色的互补色。

常用的有光电管和光电倍增管，近年来使用光多道检测器，具有快速扫描的特点。

可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320-2500nm。

当一束平行单色光照射到任何均匀、非散射的介质（固体、液体或气体），例如溶液时，光的一部分被介质吸收，一部分透过溶液、一部分被器皿的表面反射。

3．化学变化所引起的偏离

二、物质对光的选择性吸收

它既具有波动性，又具有粒子性，即波粒二象性。

它既具有波动性，又具有粒子性，即波粒二象性。;（三）双波长分光光度计;（四）光多道二极管阵列检测分光光度计;（五）光导纤维探头式分光光度计;第四节定性和定量分析方法;（二）比较吸收光谱特征性常数的一致性;二、纯度检查;三、定量分析方法;（二）标准对照法;（三）标准曲线法