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酸谈
辅修课
15表型检测：增殖（3）
主讲人猫大
信息科技
第15颗表型检测：增殖（3）
细胞增殖的定义酸谈
一群细胞
一个细胞两个细胞
克隆
陪伴医生科研成长
检测细胞增殖：平板克隆酸谈
平板克隆的原理：
陪伴医生科研成长
平板克隆操作流程酸谈
细胞计数：用台盼蓝染液染色后计数活细胞
→
铺细胞：将单细胞悬液做梯度稀释，每皿、、个细胞的梯度密度分别接种含培养基的
→皿中分散均匀。
培养：静置培养周，随时观察克隆形成状况。
→
固定：甲醇固定
→
染色：去除固定液，染色，流水洗去浮色，空气干燥
→
拍照、计数
陪伴医生科研成长
克隆形成实验分组设计酸谈
未做处理的细胞转染对照质粒的细胞转染目的的细胞
或用药物溶剂处理的细胞或用药物处理的细胞
空白对照×对照×实验组×
陪伴医生科研成长
数据处理与绘图酸谈
拍照时，使用成像仪或相机拍摄整个皿。
使用带网格的透明片叠在培养皿上，肉眼计数，或在低倍镜下计数大于个细胞的克隆数。
计算：
克隆数
克隆形成率×
接种细胞数
将次独立重复的数据都分析完后进行统计分析并绘制柱状图。
陪伴医生科研成长
知识点回顾酸谈
细胞计数
铺细胞
培养
◼适用于检测贴壁细胞
◼不适用于检测悬浮细胞、组织样本
固定
◼直接反应细胞的增
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