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应用创新题组
应用克隆动物诞生记
1.(2024山东潍坊一模,12科研情境)如图是利用生物工程技术培育转荧光蛋白基因克隆猪的过程。下列叙述正确的是()
A.①②过程都属于基因工程的范畴
B.③过程常用显微注射技术,注射前需先用Ca2+处理重组细胞
C.④过程胚胎需发育到囊胚或原肠胚阶段
D.⑤过程为胚胎移植技术,可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
答案D①过程为核移植技术,属于细胞工程的范畴,②过程属于基因工程的范畴,A错误;③过程将基因表达载体导入动物细胞常用显微注射技术,微生物细胞作为受体细胞时常先用Ca2+处理,B错误;④过程中的早期胚胎,需发育到桑葚胚或囊胚阶段以进行胚胎移植,原肠胚阶段不能进行胚胎移植,C错误。
2.(2024届河北正定中学月考四,26科研情境)现代生物科技在农畜牧业等领域应用广泛,试管牛、克隆牛、含人乳铁蛋白转基因奶牛相继诞生,请回答相关问题:
(1)试管牛培育过程中,首先要用激素处理良种母牛,让其超数排卵,但只有发育到时期的卵子才具有受精作用。同时,在胚胎移植过程中需要对供体和受体母牛进行。?
(2)克隆牛培育过程中,体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植,其原因是。?
(3)培育含人乳铁蛋白转基因奶牛过程中,所构建的基因表达载体必须包括:人乳铁蛋白基因、启动子、终止子、和复制原点等。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的。?
(4)培育试管牛、克隆牛和转基因牛三者共有的技术是、。?
答案(1)外源促性腺MⅡ同期发情处理
(2)体细胞分化程度高,不容易表现全能性
(3)标记基因受精卵
(4)早期胚胎培养胚胎移植
解析(1)对供体母畜注射外源促性腺激素可促使其超数排卵。卵子需要发育到MⅡ时期才具有受精作用。在胚胎移植过程中需要对供体和受体母牛进行同期发情处理。(2)体细胞分化程度高,不容易表现全能性,因此体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。(3)一个完整的基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点等。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的受精卵。(4)试管牛的培育主要采用了体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术;克隆牛的培育主要采用了核移植、早期胚胎培养和胚胎移植技术;转基因牛的培育主要采用了重组DNA、核移植、早期胚胎培养和胚胎移植技术。因此培育试管牛、克隆牛和转基因牛三者共有的技术是早期胚胎培养、胚胎移植。
3.(2024届广东珠海摸底,22科研情境)我国正在科学、有序推进新冠疫苗接种工作,其中科兴及北京生物两款灭活疫苗均使用Vero细胞进行病毒扩增培养(如图所示)。Vero细胞为非洲绿猴肾细胞的传代细胞系,回答以下问题:
(1)Vero细胞的培养应在培养箱中进行,箱内的气体环境条件为。?
(2)Vero细胞的传代培养过程中需要使用使细胞分散,并在合成培养基中加入等天然成分。此外,在培养过程中,应定期更换培养液,目的是。?
(3)灭活疫苗制备成功之后先进行动物试验,一段时间后检测试验动物是否产生抗体,检测的方法是。?
(4)某科研团队想利用Vero细胞系制备新冠病毒的单克隆抗体用于诊断试剂,请写出相关的实验思路?
。?
答案(1)5%CO2、95%空气
(2)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)血清清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害
(3)抗原—抗体杂交(特异性结合/凝集反应)
(4)将已对新冠病毒发生免疫的B淋巴细胞和Vero细胞系诱导融合获得杂交细胞,经筛选后获得既能迅速大量增殖又能产生特异性抗体的杂交细胞,用以生产单克隆抗体
解析(1)动物细胞培养箱内的气体环境条件为5%CO2、95%空气,其中CO2主要用于维持培养液的pH。(2)Vero细胞的传代培养过程中需要使用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)使细胞分散开,以获得单个细胞;为保证细胞正常生命活动,需要在合成培养基中加入血清等天然成分;动物细胞培养过程中,需要定期更换培养液以清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。(3)抗原与抗体的结合具有特异性,故检测试验动物是否产生抗体的方法可以是抗原—抗体杂交。(4)Vero细胞为非洲绿猴肾细胞的传代细胞系,可无限增殖,利用Vero细胞系制备新冠病毒的单克隆抗体用于诊断试剂,相关的实验思路见答案。
4.(2024甘肃兰州一诊,38科研情境:克隆猫)克隆猫“大蒜”的本体是一只英国短毛猫,它是我国首例完全自主培育的克隆猫。它的本体陪伴了主人近三年的美好时光后,因泌尿系统疾病去世,它的主人
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