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磺胺类药物

研究注解与其它常用抗生素比拟,SAs可能更易引诱菌株应

选择压力而产生耐药性。此外,SAs药物还会导致过敏反响、尿和

造血功能纷乱等副感化。如磺胺二甲基嘧啶等可能诱发啮齿类动

物如鼠的甲状腺增生,对其激素样效应和潜在致癌性质正在进

一步研究中。因为SAs在体内感化和代谢的时刻较长,经由过程

任何门路摄入的磺胺都有可能在人体中蓄积,蓄积浓度跨过必

定值时将对人体机能造成损害。是以,结合国食物法典委员会

(CAC)和专门多国度规定,食物和饲估中SAs总量以及磺胺二

甲基嘧啶等单个SAs的量均不得跨过011mg/kg。同时相伴兽药

残留毒理学的成长和风险分析手段的进步,各国对SAs在动物源

性食物中的残留限量做出了越来越严格的规定,如日本对食用

动物肌肉中磺胺二甲基嘧啶的最大年夜残留限量规定为方法检

测低限,即0101mg/kg。

关于SAs残留的检测从早期的分光光度法、荧光法、薄层色

谱法到近些年的液相色谱法、气相色谱-质谱法、液相色谱-质

谱法、毛细管电泳法和超临界流体色谱法,几乎所有的分析理论

和技巧在SAs残留分析中都获得了研究和应用,个中采取最多的

选择方法是反相高效液相色谱法(HPLC),后来成长的酶联免疫

吸附测试方法(ELISA)作为选择方法也获得了广泛的应用。然

则这些检测方法都存在处理方法繁琐,操作时刻长及只能检测

单个磺胺类药物的问题。基于细菌受体分析的CharmⅡ放射免

疫法的样品前处理提取方法简便,具有灵敏度高,特异性强的特

点,同时能够检测磺胺类残留总量,差不多为欧盟国度和美国

FDA承认同时应用于初筛分析,今朝国内尚未见有关鳗鱼的检

测报道。本研究建立了鳗鱼中磺胺类残留CharmⅡ放射免疫检

测方法。

1材料和方法

1．1设备和材料

Charm6600/7600分析仪:美国Charm公司临盆;IEC离心;

均质器;涡旋混淆器;恒温孵育器(65±1℃;80±2℃);闪

耀液加液器;50mL离心管;硼硅玻璃试管及试管塞;pH试条;

药片压杆。

1．2样品和试剂

1．2．1检测基质鳗鱼

1．2．2检测试剂磺胺类CharmⅡ检测试剂盒;闪耀液(Op

tifluor);阴性对比液;多抗标准品。

以上试剂均由美国Charm公司供给。

1．2．3磺胺类药物标准品磺胺甲基嘧啶(SM1)、磺胺二

甲基嘧啶(SM2)、磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、磺胺间二甲氧嘧

啶(SDM)、磺胺喹噁啉(SQX)、磺胺甲噻二唑(STZ)、磺胺

吡啶(SPD)、磺胺异噁唑(SIZ)、磺胺甲基异噁唑(SMZ)、

磺胺嘧啶(SD)、磺胺噻唑(ST)、磺胺甲氧哒嗪(SMP)、磺

胺氯哒嗪(SCP)。

以上标准品由Sigma公司供给。

1．2．4恩诺沙星、新霉素、庆大年夜霉素、链霉素、螺旋霉

素、林可霉素、四环霉素、氯霉素、红霉素、青霉素G标准品。

以上标准品由Sigma公司供给。

1．3方法

1．3．1测试道理

测定的差不多是竞争性受体免疫反响。用[3H]标记的磺胺

二甲嘧啶(示踪剂)与样品中磺胺类药物的竞争结合试剂(微生物

细胞上的特异性受体)上的磺胺结合位点,当样品中残留磺胺类

药物时,残留物与受体上的结合位点结合,从而阻拦了[3H]标

记的磺胺类药物与结合剂位点的结合。样品中的磺胺类药物含量

越高竞争的结合位点越多,[3H]标记磺胺二甲嘧啶的则越少,

用CharmⅡ分析仪测定样品中的[3H]含量的cpm(每分钟脉

冲数)值,cpm值越低则样品中的磺胺类药物残留量越高。

1．3．2提取步调

(1)取50mL离心管,参加10g均质好的鳗鱼糜样。

(2)参加30mLMSU提取缓冲液,强力振荡离心管