磺胺类抗生素 .pdfVIP

ApplicationTSQQuantumAccess质谱仪检测兽禽肉中Note:CM0015十七种磺胺类

药物残留刘畅1，秦峰1，徐杨1，刘婷2，Charels.Yang2，王勇为21，上海市药检

所，微生物中心，食品实验室2，赛默飞世尔科技公司色谱质谱部磺胺类药物作

为广谱抗生素，被应用于治疗农场动物按上述步骤制备空白样品提取液，取下层水

相，过的细菌性感染疾病。但由于磺胺类抗球虫药残留危害0.22μm滤膜后，进样

分析。KeyWordsTSQQuantum极大可引起人类的癌症、畸形、抗药性及某些中

毒现Access象。美国、欧盟等已明文规定禁止在食品工业中使用分析标样配置该

类药物。我国农业部第235号文件规定其在兽禽肉中用甲醇稀释磺胺标准物得到

0.1mg/mL标准储备液，保磺胺类抗生素的最高残留限量MRL为100μg/kg。存于

4℃，可使用两个月。用甲醇稀释标准储备液至LC/ESI/MS/MS5μg/mL和0.5μg/mL，

作为标准工作溶液。量取少量标准本文建立了快速测定猪肉、鱼肉和蛋中的十七种

磺工作溶液，用空白样品提取液分别定容至1mL配制得胺类化合物，以13C6-

磺胺甲恶唑为内标，定量下到10，25，50，100，250，500和1000ng/mL基质混合

标限为2μg/kg，标准曲线范围为2-200μg/kg，回收率为准曲线，保存于4℃，可使

用一个星期。20-40。AccelaU-HPLC液相色谱条件实验条件：色谱柱：Agilent

ZORBAXSB-C18150×2.1mm3.5μm；梯度仪器与试剂洗脱和流速见表1，其中A：

甲醇；B：0.1甲酸、2mMAccelaU-HPLC液相色谱仪系统，配有Accela自动进样

器甲酸铵水溶液；柱温：25℃；进样量：10μL。和AccelaPump。TSQQuantumAccess

三重四极杆串联质谱仪（赛默飞世尔科技ThermoFisherScientific公司），配有

ESI源。标准品磺胺、磺胺醋酰、磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、

磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧哒嗪、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪、

磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺甲基异恶唑、磺胺二甲异恶唑、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺

苯吡唑、13C6-磺胺甲恶唑，纯度高于95。除有特殊说明外，所用试剂至少为分析

级，水为GB/T6682规定的一级水，甲醇，异丙醇、正己烷、甲酸均为色谱纯。样

品制备将猪肉、鸡肉和蛋，搅碎、混匀，精密称取5g，置于50mL离心管中，加入

100μL1μg/mL13C-磺胺甲恶唑再加入20g无水硫酸钠和20mL乙腈（蛋液样品加25g

无水硫酸钠，且无水硫酸钠与乙腈均在临匀质前加入），匀质2分钟，3000r/min

离心3分钟，上清液倒入100mL鸡心瓶中，残渣再加入20mL乙腈，重复上述操作

一次。合并提取液，向鸡心瓶中加入10mL异丙醇，用旋转蒸发器于30℃水浴蒸干，

加入乙腈-0.01M乙酸铵（12：18）1mL和0.8mL正己烷，转移至2mL离心管中，

12000r/min离心5min吸取上层正己烷弃去，再加入0.8mL正己烷，涡旋1min后，

重复上述步骤，至下层水相变透明。TSQQuantumAccess质谱仪条件电喷雾电离源

（ESI），正离子模式；选择反应监控（SRM）扫描模式，喷雾电压：4000V；离子

传输管温度：350℃；氮气作为鞘气和辅助气，其中鞘气为35arb辅助气为3arb，

氩气用作碰撞气碰撞压力为1.5mTorr选择反应监测（SRM）离子对见表2，扫描

宽度为0.002扫描时间为0.010ms。本方法在猪肉、鱼肉和蛋中，磺胺醋酰、磺胺嘧

啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲

氧哒嗪、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺甲基异恶唑、磺

胺二甲异恶唑、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺苯吡唑的定量下限为2μg/kg。图1为2μg/kg

添加得到的典型LC/MS/MS色谱图；图2为17种磺胺类化合物的标准曲线

（2-200μg/kg）。图1，17种磺胺类化合物和内标的2μg/kg添加到基质样品中的

LC/MS/MS色谱图本方法测定十七种磺胺类抗生素，在猪肉、鱼肉和蛋结论中磺胺、

磺胺氯哒嗪、磺胺甲基异恶唑和磺胺二甲本方法建立了17种磺胺类抗生素在猪肉、

鱼肉