DB34T 2905-2017 辣椒疫霉菌检测鉴定方法.pdfVIP

ICS65.020

B20

DB34

安徽省地方标准

DB34/T2905—2017

辣椒疫霉菌检测鉴定方法

MethodfordetectionandidentificationofPhytophthoracapsici

2017-06-30发布2017-07-30实施

安徽省质量技术监督局发布

DB34/T2905—2017

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所提出。

本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所、霍山县百草林石斛发展有

限公司、寿县农业技术推广中心、宿州市植检植保站、安徽农业大学植保学院、徽州区西溪南镇政务中

心、霍山县农业技术推广中心、鸠江区农业技术推广中心、铜陵农业循环经济试验区农技站。

本标准起草人：戚仁德、赵伟、迟元凯、戚士胜、马书芳、潘月敏、张建喜、吴军、汪涛、朱德慧、

陈晴晴、刘浪、郑仁兵、唐文、刘继荣、汪海洋、李汪洋。

I

DB34/T2905—2017

辣椒疫霉菌检测鉴定方法

1范围

本标准规定了辣椒疫霉的分离、形态学和PCR检测鉴定方法。

本标准适用于辣椒、南瓜、西葫芦、西瓜、甜瓜等疑似病株上辣椒疫霉的检测鉴定。

2鉴定依据

以辣椒疫霉引致病害的症状、病菌形态学特征、PCR反应结果等为鉴定依据。辣椒疫霉的形态学特

征及其所引致病害的症状参见附录A。

3培养材料准备

3.1培养基准备

3.1.1基础培养基

基础培养基可选胡萝卜培养基、燕麦培养基、V8培养基等中的一种。

——胡萝卜培养基：

将200g新鲜的胡萝卜切成小片，加去离子水500mL，捣碎后用4层纱布过滤去渣，

补水至1000mL，加琼脂粉20g，煮沸待琼脂熔化后分装，在121℃下高压蒸汽灭菌20

min，冷却后备用。

——燕麦培养基：

称取燕麦片30g,加水1000mL，在60℃下水浴1h，双层纱布过滤去渣。上清液补

水至1000mL，加入琼脂20g，煮沸待琼脂熔化后分装，在121℃下高压蒸汽灭菌20min，

冷却后备用。

——V8培养基：

量取100mLV汁，加去离子水900mL、CaCO0.2g、琼脂20g，在121℃下高压

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蒸汽灭菌20min，冷却后备用。

——液体培养基：

将上述某一种基础培养基与去离子水按1:9比例稀释，在121℃下高压蒸汽灭菌20

min，冷却后备用。

3.1.2选择性培养基

将某一种基础培养基冷却至50℃~60℃时，按每升培养基需青霉素50mg、五氯硝基苯50mg、

多菌灵5mg和利福平100mg的比例加入，摇匀后备用。

3.2对照菌株

辣椒疫霉(PhytophthoracapsiciLeonian)菌株。