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乙型肝炎病毒表面抗体操作步骤

1.检验目的;检测人血清《或血浆中乙肝表面抗体(HBsAb)，其为保护性抗体，大多数

急性病人恢复期后为阳性，接种乙贞疫苗后产牛免疫力。

2,检验原理，在微孔条上预包被纯化乙肝表面抗原(HBsAg)，饥以酶标记抗体(HBsAg一

HRP)及TMB等其它试剂，采用类心法襄理检测人血清〈或血紧)中乙肝表

面抗体(HBsAb)

3.试剂，英科新创《厦门)科技有限公司。

3.1HBsAb微孔板〈96人份)3.2HBsAb酶标记抗点

3.3HBsAb阳性对照烟清3.4HBsAb阴性对照血清

3.5浓缩洗涤液25ml3.6底物A

3.7底物B3.8终止液(2MH2SO4)

3.9封口异3.10日封线

4试剂的贮存，

育接使用，2~8贮存至失效期，避免阳光让射。

RE

5.1平衡，将试剂伪各组分从僵中取出，平衡至室温〈18C一25C)，微孔板并封后，余者

即时以自封袋封存。

5.2配液，浓缩洗涤液配制前充分摇匀《如有品体应充分溶解)，浓缩洗泽液和节;馏水成去

离了水按1，19稀释后使用。

5.3编号:将微孔条固定于支架，按序编号。

5.4加样;用加样器加入待测烟清50uL，设阳、阳性对照各1札，每孔加入50bL，空白对

照1筷。

5.5加酶;分别在等孔中加入酶标记抗点S0uL，轻拍混匀。

5.6浊育:置37C温育30分钟，宣温下衡5分钟。

5.7洗涤:用洗涤液从分洗涤5次，洗涤完后扣干《每次应保持30一60秒的汉泡时间)。

5.8总色:每孔加底物A、B各50uL，轻拍混匀，置37人有暗置15分钟。

5.9终止;每孔加终止液SoL，溪勾。

5.10测定:用酶标仪单波长450nm或双波长430nm/630nm测定各孔OD值《用单波长测定

时需设空和门对照一孔，30分钟内完成测定，并记录结果)。

6.结果判定

6.1临界值(C.O.》的计算:临界值=阴性对照孔OD均值NX2.

阴性对照OD均值人于0.1或阳性小于0.4时应重新试验,小于0.05时以0.05计算

6.2结果判定:样品OD值SAC.O.兰1者为HBsAb阳性

样品OD值SC.O.1者为HBsAb阴性

7.标本:

3.1天访抽取空腹患者标本3.0mL《真空采岂管?，将血液放置在37立水浴中30分钟后，分

离血清。。

7.2溶血标本不能用于检测，

7.3用完的标本，应在样品管上注明日期，放置在2一8冰箱中保存一周。

7.4样曲放兽:向后，话管加入1:350的84消考液，并放曾4小时后，装入医疗过赵袋出

医院专人按医疗垃圾处理。

8.注意事项

8.!每极建议设附、阳性对照血清各两孔，设空白对赂时，不加样癌及酶标记抗体，其余各

步相同。

8.2洗涤时各和孔均须加满，防止孔口内有游离酶未能洗交加