第十章--杂合酶.pptVIP

第九章杂合酶广州大学生科院柯德森杂合酶的概念:由二种以上酶成分构成,将来自不同酶的结构单元(功能基、二级结构、三级结构、或功能域)或是整个酶分子进行组合或交换，可以产生具有所需要性质的优化酶杂合体，这种酶就是杂合酶。为什么要研究杂合酶现有酶应用于工业条件下具有稳定性和催化活性不足、底物专一性需要提高或降低；工程菌产生的酶，由于包含体蛋白复性效率低，对蛋白水解酶敏感；创造自然界不存在的功能蛋白质；研究酶的结构与功能之间的关系。第一节：杂合酶的构建策略点突变及二级结构互换：杂合酶中的二级结构互换可以产生酶的新的催化特性或其他新的物理化学特性，但同源序列的互换导致酶活力的降低，相似性越低，杂全酶可保持的酶活力越低；通过随机的点突变可以保持酶的活力。底物结合位置或活性部位的某些氨基酸残基的互换是创造新的催化能力和新的专一性特性的常用策略功能域替换：把功能域看做构建酶的组件，通过互换来构建能催化特定反应的酶。转移活性部位至同系蛋白上：将活性部位从一种酶转移到非常相关的另一种酶构建杂合体。交换结构明确的亚结构有重大意义，最适当的折叠比任意改组多肽片段更可能保留。可以改变底物的专一性：改变辅酶的专一性：改变结合活性:通过转移功能环产生新结合活性,比介入酶活性部位更直接.转移功能序列到呈现骨架蛋白上:将功能肽序列转移到球蛋白的容许区域内,以限制构象的柔性,并把这个序列呈现在受控结构中.转移活性部位到一个新的结构上:将结构清楚的活性部位转移到结构不相关的蛋白质上,仍保留转移部位的结构和功能.B-转角可以从一个蛋白质骨架转移到另一个蛋白质上.三、融合蛋白质:转移整个蛋白质,得到融合蛋白质可以是双功能的也可以是单功能的.1.设计具有专一性标签的双功能或多功能蛋白质标签结构域:是指定多肽分布的结构域,利用它来将蛋白质分配到特殊的部位,通常是核心蛋白质的独立折叠.2.天然酶系统和人工酶系统3.在人工组合的结构域间创造别构作用.第二节杂合酶的制备多数杂合酶是通过蛋白质工程法构建的,也可用DNA改组技术随机来构建什么是杂合酶?请简要论述杂合酶的应用现状及发展前景?***