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凯氏定氮仪使用方法

(一)消化

1、准备6个凯氏烧瓶，标号。1、2、3号烧瓶中分别加入适当浓度

的蛋白溶液1、0mL，样品要加到烧瓶底部，切勿沾在瓶口及瓶颈上。再

依次加入硫酸钾-硫酸铜接触剂0、3g，浓硫酸2、0mL，30%过氧化氢1、

0mL。4、5、6号烧瓶作为空白对照，用以测定试剂中可能含有的微量含

氮物质，对样品测定进行校正。4、5、6号烧瓶中加入蒸馏水1、0mL代

替样液，其余所加试剂与1、2、3号烧瓶相同。

2、将加好试剂的各烧瓶放置消化架上，接好抽气装置。先用微火加

热煮沸，此时烧瓶内物质炭化变黑，并产生大量泡沫，务必注意防止气泡

冲出管口。待泡沫消失停止产生后，加大火力，保持瓶内液体微沸，至溶

液澄清后，再继续加热使消化液微沸15min。在消化过程中要随时转动烧

瓶，以使内壁粘着物质均能流入底部，以保证样品完全消化。消化时放出

的气体内含SO2，具有强烈刺激性，因此自始自终应打开抽水泵将气体抽

入自来水排出。整个消化过程均应在通风橱中进行。消化完全后，关闭火

焰，使烧瓶冷却至室温。

(二)蒸馏和吸收

蒸馏和吸收是在微量定氮仪内进行的。凯氏定氮蒸馏装置种类甚多，

大体上都由蒸气发生、氨的蒸馏和氨的吸收三部分组成。

1、定氮仪的洗涤

定氮仪安装前，各部件需经一般方法洗涤干净，所用橡皮管、塞须浸

在10%NaOH溶液中，煮约10min，水洗、水煮10min，再水洗数次，然后

安装并固定在一只铁架台上。

定氮仪使用前，微量全部管道都须经水蒸气洗涤，以除去管道内可能

残留的氨，正在使用的仪器，每次测样前，蒸气洗涤5min即可。较长时

间未使用的仪器，重复蒸气洗涤，不得少于三次，并检查仪器是否正常。

仔细检查各个连接处，保证不漏气。

首先在蒸气发生器中加约2/3体积蒸馏水，加入数滴硫酸使其保持酸

性，以避免水中的氨被蒸出而影响结果，并放入少许沸石(或毛细管等)，

以防爆沸。沿小玻杯壁加入蒸馏水约20mL让水经插管流入反应室，但玻

杯内的水不要放光，塞上棒状玻塞，保持水封，防止漏气。蒸气发生后，

立即关闭废液排放管上的开关，使蒸气只能进入反应室，导致反应室内的

水迅速沸腾，蒸出蒸气由反应室上端口通过定氮球进入冷凝管冷却，在冷

凝管下端放置一个锥形瓶接收冷凝水。从定氮球发烫开始计时，连续蒸煮

5min，然后移开煤气灯。冲洗完毕，夹紧蒸气发生器与收集器之间的连接

橡胶管，由于气体冷却压力降低，反应室内废液自动抽到反应室外壳中，

打开废液排出口夹子放出废液。如此清洗2～3次，再在冷凝管下换放一

个盛有硼酸-指示剂混合液的锥形瓶使冷凝管下口完全浸没在溶液中，蒸

馏1～2min，观察锥形瓶内的溶液是否变色。如不变色，表示蒸馏装置内

部已洗干净。移去锥形瓶，再蒸馏1～2min，用蒸馏水冲洗冷凝器下口，

关闭煤气灯，仪器即可供测样品使用。

2、无机氮标准样品的蒸馏吸收

由于定氮仪操作繁琐，为了熟悉蒸馏和滴定的操作技术，初学者宜先

用无机氮标准样品进行反复练习，再进行有机氮未知样品的测定。常用巳

知浓度的标准硫酸铵测试三次。

取洁净的100mL锥形瓶五只，依次加入2%硼酸溶液20mL，次甲基蓝-

甲基红混合指示剂(呈紫红色)3～4滴，盖好瓶口待用。取其中一只锥形

瓶承接在冷凝管下端，并使冷凝管的出口浸没在溶液中。注意：在此操作

之前必须先打开收集器活塞，以免锥形瓶内液体倒吸。准确吸取2mL硫酸

铵标准液加到玻杯中，小心提起棒状玻塞使硫酸铵溶液慢慢流入蒸馏瓶中，

用少量蒸馏水冲洗小玻杯3次，一并放人蒸馏瓶中。然后用量筒向小玻杯

中加入10mL30%NaOH溶液，使碱液慢慢流入蒸馏瓶中，在碱液尚未完全流

入时，将棒状玻塞盖紧。向小玻杯中加约5mL蒸馏水，再慢慢打开玻塞，

使一半水流入蒸馏瓶，一半留在小玻杯中作水封。关闭收集器活塞，加热

蒸气发生器，进行蒸馏。锥形瓶中的硼酸-指示剂混合液由于吸收了氨，

由紫红色变成绿色。自变色时起，再蒸馏3～5min，移动锥形瓶使瓶内液

面离开冷凝管下口约lcm，并用少量蒸馏水冲洗冷凝管下口，再继续蒸馏

1min，移开锥形瓶，盖好，准备滴定。

在一次蒸馏完毕后，移去煤气灯，夹紧蒸气发生器与收集器间的橡胶

管，排除反应完毕的废液，用水冲洗小玻杯几次，并将废液排除。如此反

复冲洗干净后，即可进行下一个样品的蒸馏。按以上方法用标准硫酸铵