ApoE基因的检测方法.pptxVIP

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ApoE的检测方法

112158cyscyscysargargε2ε3ε4TGC,cysCGC,argcodon:112/158TGCTGCTGCCGCCGCargCGCE2(T/T)E3(T/C)E4(C/C)E2(T/T)E2/E2(TT/TT)E2/E3(TT/TC)E2/E4(TC/TC)E3(T/C)E3/E3(TT/CC)E3/E4(TC/CC)E4(C/C)E4/E4(CC/CC)

测序ARMS-PCRPCR-SSCPPCR-RFLPQ-PCR

T/CT/C112158TCCTP1P2P3P453上游引物P5下游引物A管:P1、P3、P5B管:P2、P4、P512345612345611、22、33、44、55、66分别代表基因型E2/E2、E2/E3、E2/E4、E3/E3、E3/E4、E4/E4ARMS-PCR

PCR-SSCP单链构象多态性(SSCP)是在非变性聚丙烯酰胺凝胶上,根据短的单链DNA或RNA分子碱基序列不同形成的不同构象;一个碱基的改变将影响其构象而导致其在凝胶上的移动速度改变,形成多态性。E2/E2:A,A1E2/E3:A,A1,B,B1E2/E4:A,A1,C,C1E3/E3:B,B1E3/E4:B,B1,C,C1E4/E4:C,C1

PCR-RFLPGCGCCGCGABCDEE2:····T····T···片段AE3:····T····C···片段E、DE4:····C····C···片段B、C、D112位:···GT/CGC····158位:···GC/TGC····E2/E2:AE2/E3:A,D,EE2/E4:A,B,C,DE3/E3:E,DE3/E4:B,C,D,EE4/E4:B,C,D

Q-PCRFRprobeprobeTTTCCCTTE2/E2(TT/TT)E2/E3(TT/TC)E2/E4(TC/TC)TC---E3/E3(TT/CC)E3/E4(TC/CC)CC------E4/E4(CC/CC)

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