真核基因表达调控 (6).ppt

************螺旋-环-螺旋蛋白的基序：有一条含有两个亲水的α-螺旋,链长为40~50氨基酸，两个α-螺旋由很长的连接区（环）相连，螺旋的一侧有疏水氨基酸，两条链依赖疏水氨基酸的相互作用形成同二聚体或异二聚体，此螺旋区长约15~16氨基酸，含有各种保守的残基，连接环的长度不等，一般为12~28氨基酸。与DNA结合的是碱性区，长为15氨基酸，其中有6氨基酸为碱性。在HLH中带有碱性区的肽链称为碱性HLH（bHLH，protein）。bHLH又分为两类。A类是可以广泛表达的蛋白，包括哺乳动物的E12/E47（可和免疫球蛋基因增强子中的元件结合）和果蝇da（daughterless,性别控制的总开关基因）的产物；B类是组织特异性表达的蛋白，包括哺乳动物的MyoD(肌浆蛋白（myogen）基因的转录因子)和果蝇的AC-S（achaete-scute无刚毛基因的产物）这种bHLH可能是一种转录调控蛋白，大部分以异二聚体形式存在。******************************************4.mRNA5’端非编码区长度对翻译的影响（1）5’端非编码区的长度在17～80核甘酸时→体外翻译效率正比于其长度。（2）当第1个AUG离5’帽结构太近时→不易被40S亚基识别→约在12个核苷酸内→有一半以上核糖体会滑过第1个AUG。如FN5’端非编码区长达267个碱基→表达量↑（二）mRNA稳定性调节mRNA的稳定性差别很大，调节受自身内在因素和其它因素影响。第96页,共109页，星期六，2024年，6月mRNA稳定性调节3′端非编码区结构影响其稳定性：3′端非编码区富含A和U的结构，引起mRNA不稳定；茎环结构及其与蛋白分子的结合，增加mRNA稳定性。蚕蛹羽化成蛾后，需大量蛋白水解酶溶解蚕丝蛋白，mRNA半衰期达100小时，其他仅2.5小时小分子RNA对翻译水平的影响RNAi第97页,共109页，星期六，2024年，6月第98页,共109页，星期六，2024年，6月8.5翻译后水平的调控第99页,共109页，星期六，2024年，6月（一）新生肽的水解——基因表达调控1个重要环节。影响新生肽（Pr.）寿命长短因素——1.产物类别，如fos、myc原癌基因产物、寿命↓2.运输速度，出胞浆→到各需要地方（如内质网、线粒体、叶绿体、核内）慢、寿命↓3.肽链自身因素（1）酶切位点多、降解↑（2）肽链N-端第1个AA：Met.ser、Thr、Ala、val、cys、Gly、pro是“稳定化AA”。其余12个AA是“去稳定AA”（destabilizingaminoacid）。去稳定AA——是由特定的酶加到肽链N-端的。肽链合成的起始总是Met，肽链合成后→Met被切除→而氨基酰-tRNA蛋白质转移酶→会在肽链N端加上1个AA→这种修饰决定了肽链N端是1个稳定化AA还是/1个“去稳定AA”。第100页,共109页，星期六，2024年，6月（二）肽链中氨基酸的共价修饰影响Pr.活性→如可逆的甲基化、磷酸化、酰基化→使Pr.有、无活性。（三）通过信号肽分选、运输、定位信号肽（signalpeptide）→用来引导Pr.进入亚细胞结构→有不同结构特点，信号通常（但并不总是）从合成后的Pr.上被除去。（四）分泌蛋白、膜蛋白N端信号肽的去除（五）蛋白质折叠第101页,共109页，星期六，2024年，6月多层次调控失活真核生物基因表达调控的复杂性：不仅包括细胞对外界环境刺激的反应，也包括细胞生长、分化和发育过程中基因的表达调控。第102页,共109页，星期六，2024年，6月第103页,共109页，星期六，2024年，6月第104页,共109页，星期六，2024年，6月第105页,共109页，星期六，2024年，6月cAMPresponseelementCRE–bindingprotein第106页,共109页，星期六，2024年，6月TRE：TPAresponseelement第107页,共109页，星期六，2024年，6月Summary真核生物基因表达的调控1.DNA水平的调控遗传物质的丢失;基因拷贝扩增；基因重排；DNA甲基化；染色体或染色质结构（组蛋白的修饰）2.转录水平的调控，主要对转录起始的调控顺式作用元件（启动子，增强子，沉默子等）；反式作用元件（转录因子，转录调节蛋白