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辅酶Ⅰ生产工艺
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辅酶Ⅰ（CoⅠ，又称NAD、DPN）为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，是脱氢酶的辅酶，
在生物氧化过程中作为氢的受体或供体，起传递氢的作用，可加强体内物质的氧
化并提供能量。临床试用于精神分裂症、冠心病、心肌炎、白细胞减少症，急慢
性肝炎、迁移性肝炎及血小板减少症，也是重要的多种酶活性的诊断试剂。
1.化学结构和性质
CoⅠ是由烟酰胺及腺嘌呤各一分子与D-核糖及磷酸各两分子组成的。排列
顺序为烟酰胺-D-核糖-磷酸-D-核糖-腺嘌呤。
CoⅠ是具有较强的吸湿性的白色粉末，易溶于水或生理盐水，不溶于丙酮等
有机溶剂，为两性分子，等电点PH3，在干燥状态和低温下稳定。对热不稳定，
水溶液偏酸或偏碱都易破坏。
广泛存在于动植物中，如酵母、谷粒、豆类、动物的肝脏、肉类等。制备时
用酵母作原料，分离提取。
2.以酵母为原料的制造工艺
2.1技术路线
（破壁、提取）（分离）
沸水，冰块201×7树脂
新鲜压榨酵提取液滤液
16小时
（吸附）（洗脱）（中和、吸附）
HCI，122树脂NHOH001×7树脂，NHOH，201×7树脂
吸附物4洗脱液4
PH2～2.5PH＝7
（洗脱、吸附、洗脱）
KCI，766型活性炭，丙酮：乙酸乙酯：水：浓氨水
吸附物洗脱液
（沉淀）（干燥）
HNO丙酮
3沉淀物CoⅠ成品
PH2～2.5，0℃
1
2.2工艺过程
2.2.1破壁、提取、分离：将新鲜压榨酵母在搅拌下加入等量的沸水中，加
热至95℃保温5分钟，迅速加入2倍酵母重量的冰块。过滤，滤饼用常水洗涤2
次，合并滤、洗液，得约为酵母重量5倍的提取液。加入强碱性季铵Ⅰ型阴离子
交换树脂201×7（717），搅拌16小时，过滤，收集滤液。
2.2.2吸附、洗脱：取滤液用浓盐酸调PH至2～2.5,流经弱酸性丙烯酸系
阳离子交换树脂122树脂柱吸附CoA，滤液︰树脂＝1︰0.0146（W∕W）,控制流
速6L∕min。吸附完毕，用无热原水先逆流后顺流洗涤至流出液澄清为止，流速
为10L∕min，再用0.3mol∕L氢氧化铵液以2L∕min流速进行洗脱，用量为122
树脂的5.5～6倍（V∕W）。当流出液呈淡咖啡色，经340nm分光测定，OD值大
于0.05（稀释15倍）时，开始收集，直至流出液呈淡黄色，而OD值小于0.05
时为止，得洗脱液。
2.2.3中和、吸附：将强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂001×7（732）加至
洗脱液中（按洗脱液8～9.3L加树脂1Kg计），搅拌，测PH应为5～7，过滤，
滤饼用无热原水洗涤，合并洗滤液，加稀氨水约15﹪左右，调PH至7（不低于
7），得中和液。再将中和液流经强碱性季铵I型阴离子交换树脂201×7（717）
50～60目柱进行吸附
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