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第五章噬菌体与杂菌的防治
发酵工业中存在噬菌体和杂菌的污染,其产生的危害P113
①噬菌体会使产生菌的菌体发生自溶而危害生产。
②其他杂菌或消耗大量营养,破坏原有营养条件,导致生产菌营养不足。
③产生代谢产物改变环境的理化条件,抑制生产菌形成产物。
④破坏发酵产物或将其当营养消耗而造成目的产物损失。
⑤污染直接影响发酵产物的产量,甚至导致倒灌而一无所获。污染还会使发酵液难于过滤杂
质而影响产品质量。
并灌法:即将其它灌批发酵16~18h的发酵液,以等体积混合后分别发酵,利用其活力旺盛的种子,不进行加
热灭菌,亦不需另行补种,便可正常发酵。
噬菌体污染的异常现象:“二高三低”即pH高、残糖高;0D值低、温度低、谷氨酸产量低。
1.二级种子0~3h:泡沫大、pH高,种子基本不长;6h以后感染噬菌体,泡沫多、pH偏高,
种子生长较差;轻度感染或后期感染常看不出异常变化,可用快速检测法,半小时就能确定
是否污染噬菌体。甚至8~9h感染,即产生0D值不长、pH上升、泡沫大、耗糖慢、不产酸等典型噬菌体污
染现象。
2.发酵前期(0~12h)污染噬菌体:①吸光度开始上升后下降、不升或回降,甚至4~8h内
0D值竟然下降到零以下。②pH足渐上升,升到8.0以上,不在下降;排气C02—反常态,C02迅速下降,
相继出现0D值下跌、pH上升、耗糖慢等异常现象。③耗糖缓慢或停止,也有时出现睡眠病现象,发酵缓
慢,周期长,提取困难。④产生大量泡沫;发酵液黏度大,可
拔丝;发酵液发红、发灰;有刺激性气味。⑤谷氨酸产量甚少,或增长极为缓慢。⑥镜检时可发现菌体数量
显著减少。⑦平板检察有噬菌斑;摇瓶检查发酵液清晰;快速检测法0D42O
2》0D65O1.⑧二级种子营养要求足渐加多,种龄延长;发酵周期足罐延长;提取困难,收率低。⑨送往提取
车间的发酵液,发红、发灰、残糖高、有刺激性臭味,泡沫大、粘度大、难中和。⑩精制中和时,色素深、
泡沫大,碱加不进去,过滤也有困难,过滤时间增加;成品色重、透光性差,收率低。
噬菌体污染的防止措施:以环境净化为中心的综合治理:定期检查噬菌体、严禁活菌体排
放、杀灭环境中的噬菌体、杀灭压缩空气中的噬菌体、严格无菌操作、避免噬菌体侵入设备。污染噬菌体后
的挽救措施:并罐法(噬菌体不能侵染产酸期细胞)、菌种轮换(不交叉感染)、放罐重消法(高温灭
菌)、低温灭菌法预防措施:空气净化(1.减少滤前空气的尘粒,2.减少滤前空气的油水含量3•保证压缩空
气的温度4.妥善装填过滤介质5.选用高效滤材)、培养基和设备灭菌(1.合理调配培养基2•保证灭菌温度和
时间3.保证设备无积污和渗漏4.保证流动蒸汽质量5.尽量减少泡沫6.正确进行空气保压)、发酵设备安装
(1.防止轴封渗漏2.合理安排罐内装置3.合理安装管路
4.阀门的链接)、培养物的移接
(1.严格进行斜面和摇瓶菌种的无菌操作2.严格进行种子罐
的无菌操作)
补救措施:补加种子、补加糖、直接放罐
染菌原因分析
从染菌时间分析:早期:培养基灭菌不彻底中后期:设备渗漏、空气系统
从染菌类型分析:芽孢杆菌:灭菌不彻底、球菌、酵母等:设备渗漏从染菌幅度分析:个别罐:参照上面
大面积罐:空气系统、种子第六章谷氨酸的提取
谷氨酸提炼:将谷氨酸生产菌在发酵液中积累的L-谷氨酸提取出来,再进一步中和、除铁、
脱色、加工精制成谷氨酸单钠盐叫谷氨酸提炼。
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