甾体激素类药物 (2).ppt

三、雌酮:Zimmermann反应四、甲醇和丙酮:气相色谱法。五、硒:方法已介绍。第31页,共53页，星期六，2024年，5月第四节含量测定一、紫外分光光度法1．原理“C=C-C=C”或“C=C-C=O”共轭体系，有紫外吸收。?4-3-酮结构，?max在~240nmA环为苯环，?max在~280nm第32页,共53页，星期六，2024年，5月2．讨论①??适用于原料药。②样品中“其它甾体”不合格时，不适用。需进行分离后再测定。??第33页,共53页，星期六，2024年，5月二、四氮唑比色法1．四氮唑盐的种类：（1）红四氮唑：2,3,5—三苯基氯化四氮唑（2,3,5—triphenyltetrazoliumchloride）缩写TTC或RT（Redtetrazolium）第34页,共53页，星期六，2024年，5月（2）蓝四氮唑：3,3’—二甲氧苯基—双—4，4’—（3,5—二苯基）氯化四氮唑{3,3-dianisole-bis[4,4’-(3,5-diphenyl)triphenyltetrazoliumchloride]}缩写BT(Bluetetrazolium)第35页,共53页，星期六，2024年，5月2．原理17位?-醇酮基具有还原性，在碱性条件下能将四氮唑盐定量地为有色的甲臢，在一定波长下具有最大吸收，可用比色法进行含量测定第36页,共53页，星期六，2024年，5月3、测定法A．TTC法BP(1988);ChP(1995)：B．BT法USP(xxIII)第37页,共53页，星期六，2024年，5月4、讨论结构、反应温度和时间、水分、碱浓度、空气中氧、试剂类别和浓度等，对反应速度，呈色强度和稳定性有影响。（1）官能团位置的影响aC11：11位酮基反应速度快于11位羟基可的松氢化可的松第38页,共53页，星期六，2024年，5月bC21：α-羟基（C21-OH）①21-OH酯化后较母体羟基反应速度慢即：游离体酯类如：可的松醋酸可的松②简单酯复杂酯，醋酸酯磷酸酯琥珀酸酯三甲基醋酸酯第39页,共53页，星期六，2024年，5月（2）溶剂和水分的影响：a常用无水乙醇含水量≯5%，对结果无影响含水量为10%，吸收度约降低10%含水量为30%，反应完全受到抑制b醇中不能含有醛类—醛有还原性，使吸收度↑用无醛醇第40页,共53页，星期六，2024年，5月（3）试剂质量及加入顺序灵敏度：BTTTC；BT：空白值高，稳定性差；TTC：空白值较低▲USP规定：BT：极淡黄色，空白A值与乙醇比较≯0.03~0.06第41页,共53页，星期六，2024年，5月＊加入顺序：先加TTC或BT，后加(CH3)4N+OH-原因：皮质激素与(CH3)4N+OH-长时间接触，有部分分解。第42页,共53页，星期六，2024年，5月（4）氧及光线的影响对光敏感，在暗处显色。TTC法形成的甲臢对空气中氧敏感，使颜色强度↓，稳定性↓。＊BP规定：加入试剂后，要往容器中充N2↑，以置换反应容器中的空气。第43页,共53页，星期六，2024年，5月（5）液性：必要条件：强碱性以(CH3)4N+OH-结果较满意第44页,共53页，星期六，2024年，5月三、异烟肼法1．原理C3—酮基及某些其他位置上的酮基能与羰基试剂异烟肼在酸性条件下形成黄色异烟腙，在一定波长下具有最大吸收，可用于定量。第45页,共53页，星期六，2024年，5月2、反应条件（1）溶剂：无水乙醇，无水甲醇（2）酸的种类、浓度及异烟肼的浓度常用HClHCl：异烟肼=2M:1M时，获最大吸收度。HCl浓度：0.0074mol/L（1000ml醇中含0.625mol浓HCl）异烟肼浓度：0.0365mol/L