高效液相色谱技术在食品营养中的应用(共32张课件).pptxVIP

高效液相色谱技术在食品营养中的应用;高效液相色谱技术是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱。又因分析速度快而称为高速液相色谱。

?;;液相色谱仪的启动顺序：

固定相——非极性填料

色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号对时间的曲线图,其纵坐标为信号强度,横坐标为时间

液相色谱仪的启动顺序：

00gNaOH去离子水溶解500ml；

紫外检测器的重要进展；

先通入流动相冲洗管路系统，基线走直后，进样20μl

流动相——极性溶剂

①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

长链烷基（如C18、C22）

紫外检测器的重要进展；

在检出三聚氰胺的产品中，石家庄三鹿牌婴幼儿配方奶粉三聚氰胺含量很高，其中最高的达2563mg/kg，其他在0.

高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

③高灵敏度：紫外检测器可达0.;●高效液相色谱法主要类型：;;市场价格：11000RMB/吨

纯度99%以上，

含氮量高达66%;;;;传统测蛋白质的方法—凯氏定氮法;HPLC法检测功效成分的原理和方法;高效液相色谱技术是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。

三聚氰胺事件发生的原因：

可用高效液相色谱紫外法检测。

称取Na2HPO4·12H2O固体1.

高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

灵敏度高；

对流动相的流速和温度变化不敏感；

①选用的溶剂应当与固定相互不相溶，并能保持色谱柱的稳定性

紫外检测器的重要进展；

色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号对时间的曲线图,其纵坐标为信号强度,横坐标为时间

流路中为高压力工作状态，

利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。

③空间排阻作用：凝胶过滤和凝胶渗透色谱；

3流动相流动相要求：

市场价格：11000RMB/吨;流程及主要部件;2.主要部件;(2)梯度淋洗装置;(3)进样装置;(4)液相色谱检测器;b.光电二极管阵列检测器;光电二极管阵列检测器;c.示差折光检测器;d.荧光检测器;;流动相——极性溶剂

酸性、低离子强度水溶液，加入一定比例的能与水互溶

的有机改性剂，如乙腈、甲醇、异丙醇等有机溶剂；

固定相——非极性填料

孔径30纳米以上的烷基键合硅胶填料：

短链烷基（如C4、C8和苯基）；长链烷基（如C18、C22）

烷基的链越长，固定相的疏水性越强，流动相中加入与水

互溶的有机溶剂，以提高洗脱速度。

;流动相——极性溶剂；固定相——非极性填料;二.操作方法

溶液配制：

1．0.2%NaOH溶液500ml：

称取1.00gNaOH去离子水溶解500ml；

2．0.08mol/L醋酸溶液：

吸取冰醋酸2.30ml去离子水500ml

2HPO4-NaH2PO4pH7.0缓冲液（流动相）：

称取Na2HPO4·12H2O固体1.79g蒸馏水500ml

称取NaH2PO4·12H2O固体0.68g蒸馏水

4.1.00mg/ml青蒿素标准液：

精确称取50.0mg青蒿素标准品无水乙醇50ml（容量瓶）

5.样品液：

分别精确称取青蒿素粗品50、100、150mg于10ml具塞试管中无水乙醇5ml

超声波振荡促溶→转移至10ml容量瓶中无水乙醇10ml

;流动相处理:;;;液相色谱仪的启动顺序：;HPLC的图形结果;液相色谱图名词术语(1)