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大肠杆菌生产制备重组人胰岛素工艺.pdf

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    1.提取目的基因:

    既从人的DNA中提取胰岛素基因,可使用限制性内切酶将目的基因从原DNA中

    分离.

    2.提取质粒:

    使用细胞工程,培养大肠杆菌,从大肠杆菌的细胞质中提取质粒,质粒为环状DNA.

    3.基因重组:

    取出目的基因与质粒,先利用同种限制性内切酶将质粒切开,再使用DNA连接酶

    将目的基因与质粒缝合,形成一个能表达出胰岛素的DNA质粒.

    4.将质粒送回大肠杆菌:

    再大肠杆菌的培养液中加入含有Ca+的物质,如CaCl2,这使细胞会吸收外源基因.

    此时将重组的质粒也放入培养液中,

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