《植物源性食品中番茄源性成分的检测 实时荧光PCR法》.pdf

ICS67.050

CCSX

T/NAIA

团体标准

T/NAIA000-2024

植物源性食品中番茄源性成分的检测

实时荧光PCR法

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

宁夏化学分析测试协会  发布

T/NAIA000-2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。

本文件起草单位：宁夏回族自治区食品检测研究院、宁夏计量质量检验检测研究院、银川海关技术

中心。

本文件主要起草人：岳苑、冯秀娟、何淑桢、苏洋、高俊峰、姚博伟，魏嘉雯、贺生芳。

I

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植物源性食品中番茄源性成分的检测

实时荧光PCR法

1范围

本标准规定了植物源性食品中番茄源性成分的实时荧光PCR检测方法。

本标准适用于植物源性食品中番茄源性成分的Taqman探针实时荧光PCR定性检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1实时荧光PCRreal-timePCR

在PCR反应体系中加入荧光集团，通过荧光信号的积累实时监控整个PCR扩增过程。

3.2Ct值cyclethreshold

每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。

4原理

提取试样中基因组DNA，以DNA为模板，利用番茄特异性引物及探针进行实时荧光PCR扩增检测，

同时设置阳性、阴性及空白对照。根据扩增的Ct值，判定试样中是否含有番茄源性成分。

5试剂与材料

除另有规定外，试剂为分析纯或生化试剂。实验用水符合GB6682的要求。所有试剂均用无DNA酶污

染的容器分装。

5.1引物与探针

5.1.1内参照（18S）

引物：5´-CCTGAGAAACGGCTACCA-3´

5´-CGTGTCAGGATTGGGTAAT-3´

探针：VIC-TGCGCGCCTGCTGCCTTCCT-BHQ1

5.1.2番茄源性成分

引物：5´-AGACCACGAGAACGATATTTGC-3´

5´-TTCTTGCCTTTTCATATCCAGACA-3´

探针：FAM-CTCTTTGCAGTCCTCCCTTGGGCT-BHQ1

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5.2植物基因组DNA提取试剂盒：提取步骤及使