生物学基本技能 课件 Ⅶ 显微操作.pptx

生物学基本技能

基本技能Ⅶ显微操作

目录CONTENTS01.实验目的02.显微镜的分类03.显微镜介绍及其使用方法04.实验操作实训

1.了解各种显微镜的原理和结构。2.掌握一般显微镜的使用方法。一、实验目的

显微镜是由一个透镜或几个透镜组合构成的一种光学仪器，主要用于将微小物体放大至人的肉眼能看到。（一）显微镜的分类通常情况下，显微镜分为光学显微镜和电子显微镜两大类。常见的光学显微镜有普通光学显微镜、解剖显微镜、倒置显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、激光扫描共聚焦显微镜、偏光显微镜、视频显微镜、超声波扫描显微镜等。常见的电子显微镜有扫描电子显微镜、透射电子显微镜等。按使用目镜的数目可分为单目显微镜、双目显微镜和三目显微镜三大类。按其用途以及应用范围可分为生物显微镜、解剖显微镜、金相显微镜等。按光学原理可分为偏光显微镜和相差显微镜等。按光源类型可分为普通光学显微镜、荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜等。按显微镜物镜的位置又可分为正置显微镜和倒置显微镜等。二、显微镜的分类

（二）显微镜的应用领域二、显微镜的分类种类应用领域普通光学显微镜医学、物理学、化学等其他学科和领域。如医学病理学、组织胚胎学、医学微生物学、医学寄生虫学、医学生物学、医学免疫学、细胞生物学等解剖显微镜①作为动物学、植物学、昆虫学、组织学、考古学等的研究和解剖工具；②对纺织工业中原料及棉毛织物进行检验；③在电子工业中，做晶体等的装配工具；④对各种材料气孔形状腐蚀情况等的表面现象进行检查；⑤对文书、纸币的真假做判断；⑥对透镜、棱镜或其他透明物质的表面质量及精密刻度的质量进行检查等倒置显微镜多用于无色透明的活体观察。供医疗卫生单位、高等院校、研究所用于观察微生物、细胞、细菌、组织培养、悬浮体、沉淀物等，可连续观察细胞、细菌等在培养液中繁殖分裂的过程，并可将此过程中的任意形态拍摄下来。在细胞学、寄生虫学、肿瘤学、免疫学、遗传工程学、工业微生物学、植物学等领域中应用广泛暗视野显微镜用来研究活细胞的形态和运动。最适于观察微粒相差显微镜可观察未经染色的标本和活细胞，如细胞的生长、运动、分裂、分化、衰老和死亡过程中细胞形态及其内部结构的连续变化荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。荧光显微镜技术主要用于检测与荧光染料共价结合的特殊蛋白质或其他分子，在生物医学领域应用广泛

（二）显微镜的应用领域二、显微镜的分类种类应用领域激光扫描共聚焦显微镜用于观察各种染色、非染色和荧光标记的组织和细胞偏光显微镜主要用于研究透明与不透明各向异性材料。被广泛地应用在矿物、化学等领域视频显微镜适用于电子工业生产线的检验、印刷线路板的检定、印刷电路组件中出现的焊接缺陷(印刷错位、塌边等)的检定、单板PC的检定、真空荧光显示屏VFD的检定等超声波扫描显微镜可灵敏地探测封装器件内部不连续型缺陷，如分层、开裂、空洞等，广泛应用在判别密度差异、弹性模量、厚度和几何形状变化等方面扫描电子显微镜在陶瓷材料及其微观结构分析研究方面具有极大的优势，还可以应用在纳米级别材料的形貌观察和尺寸检测、观察电畴和畴壁的显微结构及相变的动态原位观察（电畴壁的迁移）等透射电子显微镜在材料科学、生物学领域应用较多

（三）性能指标在显微镜的性能指标中最重要的是分辨率，其他如镜口率、放大率、焦点深度、镜像亮度和视野亮度也各有其重要意义。1）分辨率。分辨率也称分辨本领，是指能区分开两个物点间最小距离的能力。两物点间的最小距离称为分辨距离。分辨距离越小，说明显微镜的分辨率越高。2）镜口率。镜口率又称数值孔径，刻在物镜筒外侧和聚光镜上。镜口率与分辨率成正比，镜口率越大，显微镜的分辨率越高。3）放大率。最终成像的大小与原物体大小的比值称为放大率。选用物镜和目镜时应注意两者的配合，如选用数值孔径大的物镜和倍数小的目镜，虽最终放大率相等但可保证高分辨率。总放大率＝物镜放大率×目镜放大率。4）焦点深度。将焦点调在样品上的某一平面时，能看清楚这一平面及其上下的结构，此清晰部分的厚度称为焦点深度。焦点深，可保证观察到被检物体的全层，但焦点深度与（总放大率）和数值孔径呈反比。5）镜像亮度。镜像亮度与数值孔径的平方呈正比，与总放大率的平方呈反比。在同一放大率下选用不同数值孔径的物镜，其镜像亮度也不同。6）视野亮度。要得到足够的视野亮度，必须用强光源、开大光阑、使聚光镜与物镜两者的镜口角一致，才能使充足的光束进入物镜。二、显微镜的分类

（一）普通光学显微镜1）成像原理又称明视野显微镜，物镜和目镜的作用都相当于一个凸透镜。首先光射到物体上，再从物体射入物镜和目镜，最后射入观察者的眼睛，在此过程中成像并放大。成像过程为被检标本是放在物镜下方1～2倍焦距处，所以物镜可使标本在物镜上方形成倒立放大的实像。该实像