生物学基本技能 课件 ⅩⅢ 离心操作.pptx

生物学基本技能

基本技能ⅩⅢ离心操作

目录Contents实验目的常用离心机类型常用离心管类型离心原理和技术参数离心机操作技术离心机的日常维护、常见故障及排除实验操作实训

1.了解离心机的类型、结构原理及使用注意事项。2.掌握各种离心机的操作技术和技能。3.掌握离心机的一般维护和维修技能。一、实验目的

二、常用离心机类型分类标准具体类型特点按离心机的转速低速离心机一般离心最大转速为3000～10000rpm，用于收集易沉降的大颗粒物质，如红细胞、酵母菌等，广泛应用于生物化学、免疫学等领域，是实验室中离心沉淀的常用仪器高速离心机一般离心最大转速为10000～30000rpm，通常用于微生物菌体、细胞碎片、大细胞器、免疫沉淀物等的分离纯化，广泛应用于生物与化学等科研、教学和生产部门超速离心机一般离心最大转速为30000～80000rpm，能使在电子显微镜下观察到的亚细胞分离分级，还可分离病毒、核酸、蛋白质和多糖等按离心机的结构台式离心机又称为卧式离心机，主要用于悬浮液的固液分离，或将乳浊液中两种密度不同又互不相溶的液体分开落地式离心机又称为立式离心机，具有体积小、容量大等特点，其性能稳定、速度可调并能自动调节平衡，使用效率高，适用性广按离心机的分离方式过滤离心机工作原理主要是通过离心力，将混合液甩向转鼓壁，液体通过转鼓壁上的小孔及内部的滤网流出，而固体由于颗粒较大，被滤网截留沉降离心机通过固液体（或液液体）不同的比重差来进行分离。主要用于少量样品的分离按离心机的温度控制范围常温离心机常温低速离心机，在实验室常温下使用，转速可以达到5000rpm。常温高速离心机，在实验室常温下使用，转速可以达到12000rpm冷冻离心机分为低速冷冻离心机和高速冷冻离心机。前者转速一般不超过4000rpm；后者转速可达20000rpm以上，多用于收集微生物、细胞碎片、细胞、大的细胞器、硫酸沉淀物以及免疫沉淀物等

（一）按离心管材质分类1）塑料离心管。塑料离心管常用的材料有聚乙烯（PE）、聚碳酸酯（PC）、聚丙烯（PP）等，其中聚丙烯管性能相对较好。塑料离心管的优点是硬度小，可用穿刺法取出样本；缺点是易变形、抗有机溶剂腐蚀性差、使用寿命短。2）玻璃离心管。使用玻璃离心管时离心力不宜过大，需要垫橡胶垫，防止管子破碎。高速离心机一般不选用玻璃离心管。玻璃离心管盖封闭性不够好，液体不能加满(针对高速离心机且使用角转子)，否则会使液体外溢，失去平衡。外溢后果是液体污染转子和离心腔，影响感应器正常工作。超速离心时，液体一定要加满离心管，因为超速离心需要抽高真空，只有加满才能避免离心管变形。3）金属离心管。金属离心管一般采用不锈钢材质。不锈钢离心管具有强度大、不变形、抗热、抗冻、抗化学腐蚀等优点。其主要用于工业生产，但同时要注意避免接触如强酸等腐蚀性的化学物质。三、常用离心管类型

（二）按离心管底部形状分类1）锥形离心管。也称为尖底离心管，底部为锥形。当样品量少而需收集沉淀时，用锥形离心管更容易分离，上层液更容易用吸管吸取，是使用最多的离心管。2）平底离心管。用途和锥形离心管相同，但平底离心管可以立放，实验中更方便放取。3）圆底离心管。当进行密度梯度离心时，最佳选择是圆底离心管，圆底底面积大，较锥形底能承受更大的离心力。三、常用离心管类型

三、常用离心管类型

（三）按离心管容量分类1）微量离心管。微量离心管是一种小型的离心管，又称EP（eppendorf）管，常与微型离心机配套使用，用于微量试剂的分离。其常见容量规格有0.2mL、0.65mL、1.5mL、2mL。2）普通离心管。普通离心管是实验室最常见的离心管，常见的容量规格为15mL、30mL、50mL。3）大容量离心管。大容量离心管又称为离心瓶或离心杯，是大容量细胞收获、切粒和蛋白纯化的离心选择，常用于工业化生产。其常见的容量规格为250mL、500mL、600mL。三、常用离心管类型

（四）按离心管盖闭合方式分类1）压盖离心管。以按压方式密封的离心管，常见于微型离心管，都属于压盖离心管。2）螺旋盖离心管。容量50mL以上的离心管以螺旋盖离心管为主。螺旋盖离心管又可分为平盖（盖子顶部是平的）和塞盖（盖子顶部有塞子形状）。三、常用离心管类型

（一）基本概念1）离心力（centrifugalforce,Fc）。离心力是指由于物体旋转而产生脱离旋转中心的力，也指物体做圆周运动所产生的向心力的反作用力。当物体所受外力小于运动所需要的向心力时，物体将向远离圆心的方向运动，这种运动称为离心运动，也叫离心现象。离心运动是由向心力消失或不足导致的。在一定角速度下做圆周运动的任何物体都受到一个向外的离心力，离心作用是根据这一原理进行的。离心力（Fc）的大小等于