吉玛siRNA 中文操作手册.pdf

全

GenePharma

THERNAiCOMPANY

RNAi产品使用手册

上海吉玛制药技术有限公司

ShanghaiGenePharmaCo.,Ltd.

IT，RNAi简介

A.RNAi实验原理

B,RNAi实验流程

C.RNAi实验所雷试章

D.上海古翅RNAI相关产品

I[.siRNA设计

A.哺乳动物siRNA设计

B.上海十玛siRNA产品特性

C.siRNAoligo技术数据

II、sSiRNA对照

和等道前性对晤

B，菊光标记的阴性对昭

C.siRNA阳性对照

D.转染试剂对照

E.避免ofEtarget对照

IV，SiRNA转染

AsSiRNA转染的方法

B，RNAi-Mate转染试剂

C，RNAi-Matc适用的细胞类型

D.，转染前细胞培养

E，RNAi-Matc:siRNA7DNA比例

F.。贴壁绸胞转染程序

G，巧浮细胞siRNA转染程序

工，DNA和siRNA共转染细胞程序

『体内SiRNA导入方法

siRNA转染芝见问题5建议

A.siRNA细胞转当条件优化

B.Real-TimePCRRNAi效果检测

C.Real-TimePCR结果分析

YI，蛋白质水平RNAi效果监测20

人.westernblot原理

B,westerm-blot操作步骤

C.western-blot上样液的制备

D.wecstern-blot常用试剂的配制

姬，RNAi实验常见问题解答22

I.RNAi简介

ARNAIi实验原理

RNA干扰CRNAinterfering，RNAi)坝象是出与靶基因序列同源的双链RNA(double-strandedRNA，dsRNA)引发

ENEEGEEEEE

的核酸酶Dicer将dsRNA裂解成由21-25个核苷酸纽成的小于扰RNA(smallinterferingRNA，siRNA)，随后siRNA作为

介革子引起特异性地降解相同序列的mRNA，从而阻断相必某央表达的转录后某央沉默机制。

全二二二二二全全三

Dicer

dsRNA

了

SIRNADuplexE已已um

SiRNA-ProtelnComplexRISC

ATP

RISCActivation

Ai、