红细胞检验—网织红细胞计数（临床检验技术）.pptx

网织红细胞计数

2网织红细胞(reticulocyte，Ret)是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸(RNA)，经煌焦油蓝等活体染色后，嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒，连缀成线，线连接成网。属于尚未完全成熟的红细胞(当嗜碱性物质消耗殆尽后才被视为成熟红细胞)，一般为8～9.5μm。

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任务网织红细胞计数十PARTTEN

目录检测原理1参考范围3质量保证24临床意义

检测原理

1.普通光学显微镜法活体染色（新亚甲蓝或煌焦油蓝)的碱性着色基团网织红细胞RNA的磷酸基(带负电荷)RNA胶体间的负电荷减少而发生凝缩，蓝色的点状、线状或网状结构，显微镜下计数1000个红细胞中所占的网织红细胞数，以百分比或分数数表示。

流式细胞仪法2．仪器法网织红细胞计数仪血液分析仪法。荧光染料与网织红细胞中RNA结合，发出特定颜色的荧光进行RNA定量精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数(Ret％)。将网织红细胞分成高、中、低荧光强度网织红细胞比率(HFR、MFR、LFR)并计算网织红细胞其他参数。

血液分析仪法提供与网织红细胞相关的多个参数，网织红细胞绝对值、网织红细胞百分比、网织红细胞平均体积、网织红细胞血红蛋白分布宽度、网织红细胞血红蛋白浓度、网织红细胞平均血红蛋白浓度、LFR、MFR、HFR、网织红细胞成熟指数。

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质量保证以手工计数法为重点

1．染料选择

2．正确辨认网织红细胞外周血中网织红细胞主要为Ⅳ型，凡含有2个以上网织颗粒的红细胞均应计为网织红细胞。3．网织红细胞计数方法(1)Miller窥盘：(2)显微成像系统：计算机和细胞形态分析软件，①HFR：粗颗粒堆积成网状。②MFR：粗颗粒在10个以上，或细小颗粒超过15个。③LFR：细胞内含15个以下细小颗粒

参考范围

网织红细胞百分数成人和儿童:0.005～0.025新生儿:0.02～0.06网织红细胞绝对数成人和儿童:(24～84)X109／L参考值

临床意义4

1．评价骨髓增生能力，判断贫血类型。

(1)网织红细胞增多：表示骨髓造血功能旺盛，各种增生性贫血(2)网织红细胞减少：常见于再生障碍性贫血(3)鉴别贫血：

2．评价疗效(1)观察贫血疗效：贫血随访缺铁贫或巨幼贫有效治疗后，2～3d后Ret开始上升，7～10d达到最高峰(约10％)，2周后渐降至正常。(2)骨髓移植后监测骨髓造血恢复：骨髓移植后第21天，如Ret大于15X109／L，常表示无移植并发症；若骨髓开始恢复造血功能，首先HFR和MFR上升，其次为网织红细胞计数值上升。

3．放疗和化疗的监测指导临床适时调整治疗方案，避免造成严重的骨髓抑制。机体接受放、化疗后，如出现骨髓抑制，早期HFR和MFR降低，而后网织红细胞数值降低；停止放、化疗，骨髓功能恢复后，这些指标依次上升。

网织红细胞计数

实验原理实验器材实验试剂操作步骤目录CONTENTS计算参考值注意事项思考题

实验原理用等渗稀释液将血液按一定倍数稀释，充人计数池后显微镜下计数一定体积内红细胞数，换算求出每升血液中红细胞的数量

试验器材、试剂显微镜、改良Neubauer血细胞计数板等试验器材试剂红细胞稀释液

改良牛鲍氏计数板

操作步骤01取中号试管1支，加红细胞稀释液2.0ml。02用清洁干燥微量吸管取末梢血10μl，擦去管外余血后加至红细胞稀释液底部，再轻吸上层清洗吸管2-3次立即混匀。03混匀后，用干净微量吸管将红细胞悬液充人计数池，不得有空泡或外溢，充池后静置2-3min后计数。04高倍镜下依次计数中央大方格内四角和正中共5个中方格内的红细胞。对压线细胞按数上不数下、数左不数右的原则进行计数

计数原则

计算红细胞数/L=5个中方格内红细胞数×5×10×200×106=5个中方格内红细胞数×1010=5个中方格内红细胞数÷100×1012式中：×5