11第十一章 维生素的测定.ppt

第十一章维生素的测定第十一章维生素的测定第一节概述第二节水溶性维生素的测定第三节脂溶性维生素的测定第一节概述第一节概述维生素是调节人体各种新陈代谢过程不可少的重要营养素；仅少数维生素可以在体内合成，大多数维生素都必须由食物供给。维生素作为强化剂在食品工业产品中使用，测定食品维生素含量，不仅可评价食品营养价值，还起到监督维生素强化食品剂量，以防摄入过多维生素引起中毒。第一节概述脂溶性微生物素（如A、D、E、K等）；水溶性维生素（如B1、B2、B6、C、B12等）。维生素A：是人体必需营养素，能促进人体发育，防止眼膜炎、夜盲症等疾病。维生素B1：也叫硫胺素，对人体的功能主要是防脚气病、神经炎，帮助消化，促进发育。维生素B2：对人体功能防口角炎、皮肤炎，防止怕光现象。维生素C：防坏血病，促进外伤愈合，使机体增强抵抗力。维生素D：调节体内矿物盐的平衡，特别是对人体内钙、磷的代谢，并能防止软骨病。第一节概述维生素的分析方法可分为以下几种：（1）涉及人体和动物的生物分析方法。（2）利用原生动物、细菌和酵母的微生物分析方法（3）分光光度法、荧光法、色谱、酶法和免疫等物理化学分析方法。第二节水溶性维生素的测定2.1维生素C的测定Vc(抗坏血酸)抗坏血病作用，是一种己糖醛基酸，主要为还原型及脱氢型两种广泛存在于植物组织，新鲜水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富易被氧化，是一种抗氧化剂水溶液中易被氧化，碱性条件下易分解，弱酸条件较稳定Vc（还原型）可氧化为脱氢型抗坏血酸（有生理作用）。如果进一步水解则生成2,3-二酮古乐糖酸，失去生理作用。2.1维生素C的测定根据Vc还原性质测定Vc含量，常用测定方法有:2,6-二氯靛酚滴定法（还原型VC）2,4-二硝基苯肼比色法（总VC）碘酸法碘量法荧光分光光度法2.1维生素C的测定——2,6-二氯靛酚法原理还原型抗坏血酸还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色（在中性或碱性溶液中呈蓝色），被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含Vc的量成正比。2.1维生素C的测定——2,6-二氯靛酚法试剂2%草酸溶液、维生素C标准液(需标定)、2，6-二氯靛酚溶液(需标定，求出T)、淀粉溶液、KI溶液、KIO3溶液(用于标定Vc标准溶液)。操作方法提取称样50g→加2%草酸(?)100ml→倒入捣碎机中→处理→过滤→颜色若深可加白陶土（吸附剂，脱除色素）滴定吸5ml样液→于三角瓶→用染料滴定至粉红色→15秒内不褪色2.1维生素C的测定——2,6-二氯靛酚法说明与注意事项所有试剂最好用重蒸馏水配制。若测动物性样品，须用10%三氯乙酸代替2%草酸溶液提取。若样品滤液颜色较深，影响滴定终点观察，可加入白陶土再过滤。白陶土使用前应测定回收率。若样品中含有Fe2+、Cu2+、Sn2+、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等还原性杂质时，会使结果偏高。2.1维生素C的测定——2,6-二氯靛酚法说明与注意事项滴定时，可同时吸二个样品:一个滴定，另一个作为观察颜色变化的参考；样品进入实验室后，应浸泡在2%草酸液中，防氧化，维持酸性环境稳定Vc；整个操作过程中要迅速，避免还原型抗坏血酸被氧化；处理样品时，如遇有泡沫产生，可加入数滴辛醇消除；测定样液，需做空白对照，样液滴定体积扣除空白体积。2.1维生素C的测定——2，4-二硝基苯肼法(GB)原理:用酸处理过的活性碳把还原型的抗坏血酸催化脱氢生成脱氢型抗坏血酸，再继续氧化为二酮古乐糖酸。二酮古乐糖酸与2，4-二硝基苯肼偶联生成红色的脎，其吸光强度与二酮古乐糖酸浓度呈正比，可以将其溶于硫酸中比色定量。(与前述方法相比测定结果有何不同？)2.1维生素C的测定——2，4-二硝基苯肼法(GB)标准曲线的绘制50ml容量瓶5个，编号12345加0.2mg/mlVC标液(mL)1020304050取5个比色管取上述定容后的溶液22222加硫脲溶液（滴）111112，4-二硝基苯肼（mL）0.50.50.50.50.5于37℃保温箱3～4小时，取出于冰浴中，然后滴加85%硫酸2.5ml→取出放30分钟→在540nm下测各吸光值绘标准曲线，同时做空白。2.1维生素C的测定——2，4-二硝基苯肼法(GB)样品处理与分析适量样品→加等量2%草酸→高速捣碎机捣碎→取匀浆20g→1%草酸定容100ml→