血小板血型相容性试验检测技术课件.pptVIP

血小板抗体检测方法-固相凝集法抗原：患者自身血小板(因ITP患者体内血小板数量较低，因此试验前需将调节血小板浓度至50-100×109/L）。意义：自身免疫性血小板减少症(ITP)是一类由自身抗体导致血小板破坏增多的出血性疾病。多数学者认为与体液免疫有关，机体对血小板相关抗原发生免疫反应，产生抗血小板抗体，抗体致敏的血小板由单核巨噬细胞系统迅速清除而发病，且骨髓巨核细胞有成熟障碍。ITP的诊断目前仍依赖临床表现和骨髓检查，并以排除血小板减少的其它原因为基础，因此，急需特异性强的实验室诊断方法和诊断指标。检测血小板自身抗体已成为ITP诊断的一个重要指标。（二）自身抗体检测血小板抗体检测方法-固相凝集法直接法：自身结合抗体检测患者血小板反应板（已包被血小板单抗）50g,5min离心洗涤3次50μl/孔阳性反应抗人IgG指示红细胞（人IgG致敏红细胞）阳性阴性各50μl/孔200g,5min离心200g,5min离心阴性反应血小板抗体检测方法-固相凝集法间接法：自身游离抗体检测患者血小板反应板（已包被血小板单抗）血小板单层阳性反应阴性反应患者血清/血浆抗人IgG指示红细胞（人IgG致敏红细胞）50g,5min离心洗涤3次50μl/孔洗涤5次水浴30min阳性阴性50μl/孔各50μl/孔200g,5min离心200g,5min离心博德*博德ChinaNationalPharmaceuticalGroupCorporation中国医药集团总公司此ppt下载后可自行编辑血小板简介血小板：D:2~5μmV:红细胞*1/5功能：促进止血和加速凝血维持毛细血管壁完整性正常范围：100-300×109/L骨髓干细胞多功能祖细胞巨核祖细胞巨核细胞幼巨核细胞血小板胞质块脱落产生：血小板抗原共有抗原HLA抗原ABH抗原其它抗原特异性抗原（HPA抗原）血小板具有HLA-Ⅰ类抗原（HLA-A、HLA-B抗原和少量HLA-C抗原），无HLA-Ⅱ类抗原。故输注血小板要比器官移植所需配型简单。HLA-Ⅰ类分子为血小板的固有蛋白，少量从血浆中吸附。HLA抗原部分为血小板的固有蛋白，另一部分从血浆中吸附。血小板上的ABH抗原个体之间表达不同，5%-10%的非O型个体为A抗原或B抗原的高表达者。故血小板输血应同型输注；抗体检测应采用O型血小板。ABH抗原Ii,Lea,Leb,P2其它共有抗原主要存在于血小板膜的GP分子上，也少量存在于血管内皮细胞、结缔组织细胞和平滑肌细胞。1990年国际输血协会血小板免疫学工作组提出了HPA命名，以发现的时间顺序排列：HPA-1、HPA-2、HPA-3等系统，每一系统中高频率基因表达的抗原以a表示，低频率基因表达的抗原以b表示，新发现的系统以w表示。血小板特异性抗原（HPA抗原）已确定了24个HPA，其中12个抗原为双等位基因表达（HPA-1,-2,-3,-4，-5和-15），且呈共显性表达模式。单核苷酸多态性（SNP）:24个HPA中有22个已搞清楚基因背景，其中21个HPA的多态性型是由一个氨基酸置换所致，而这又是由编码血小板膜糖蛋白（GP）基因的一个核苷酸的不同所致。HPA-14bw不具有单核苷酸多态性。其核苷酸置换发生在1909-1911delAAG。血小板特异性抗原（HPA抗原）系统抗原原名糖蛋白CD核苷酸多态性HPA-1HPA-1aZwa，plAlGplllaCD61167THPA-1bZwb，plA2167CHPA-2HPA-2aK0bGplbαCD42b482CHPA-2bK0a，Siba482THPA-3HPA-3aBaka，LekaGpllbCD412621THPA-3bBakb2621GHPA-4HPA-4aYukb，PenaGplllaCD61506GHPA-4bYuka，penb506AHPA-5HPA-5aBrb，ZavbGplaCD49b1600GHPA-5bBra，Zava，Hca1600AHPA-15HPA-15aGovbCD109CD1092108CHPA-15bGova2108AHPA-6bwCaa，TuaGplllaCD611544GAHPA-7bwMoa