第二十章 病原性真菌课件.ppt

第二十章病原性真菌一、假丝酵母菌俗称念珠菌，有81个种，其中有11种对人有致病性：白假丝酵母菌、为最常见的致病菌。此外，热带假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌也较多引起疾病。第二十章病原性真菌(一)白假丝酵母菌通常存在于人的口腔、上呼吸道、肠道和阴道粘膜上，当机体发生菌群失调或抵抗力降低时，可引起念珠菌病。如婴儿的鹅口疮、假丝酵母菌性阴道炎、龟头炎、肠炎、肺炎、膀胱炎、肾孟肾炎和中枢神经系统白假丝酵母菌病，如脑膜炎、脑膜脑炎、脑脓肿等。此外，因心瓣膜手术而引发心内膜炎、长期用静脉内导管而引起全身性假丝酵母菌病，病死率极高。第二十章病原性真菌1．微生物特性白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形，直径3-6μm。革兰阳性，着色不均匀。出芽方式繁殖，在组织内可见芽生孢子、假菌丝，在玉米粉培养基中可产生假菌丝和厚膜孢子。第二十章病原性真菌2．微生物检验1)直接显微镜检查：取脓汁、痰和局部炎症性分泌物直接涂片，革兰染色后镜检，显微镜见到革兰阳性(着色不均匀)、圆形或卵圆形菌体或孢子及假菌丝，可确认为假丝酵母菌感染。2)抗原检测：取病人血清作ELISA、免疫印迹法等检测白假丝酵母菌抗原。3)核酸检测：用PCR法将白假丝酵母菌DNA分子扩增后以分子探针检测，具有较好的敏性和特异性。第二十章病原性真菌4)分离培养将标本接种在沙氏培养基上，25℃或37℃培养1～４d后，可出现奶油色类酵母型菌落。镜检可见假菌丝和芽生孢子。第二十章病原性真菌鉴定1)芽管形成试验：将假丝酵母菌接种于0.2～0.5m|血清中，37℃孵育1.5～４h观察有无芽管形成。白假丝酵母菌可形成芽管，其他假丝酵母菌不形成芽管。2)厚膜孢子形成试验：将假丝酵母菌接种于玉米粉培养基25℃孵育1-2d后，白假丝酵母菌在菌丝顶端、侧缘或中间形成厚膜孢子。第二十章病原性真菌3)糖同化或发酵试验凡发酵某种糖一定能同化该糖，故只需做那些不发酵糖的同化试验。将假丝酵母菌接种糖发酵管，25℃孵育，一般观察2～3d，对不发酵或弱发酵管可延长至10d或2—4周。观察有无酵母生长或液体培养基是否变混浊。现在商品化的产色培养基可快速鉴定白假丝酵母菌和其他假丝酵母菌。第二十章病原性真菌(3)药物敏感试验：对二性霉素B、5-FC等药物敏感，但对5-FC极易产生耐药性。(4)抗体检测：早期诊断可用ELlSA夹心法、免疫酶斑点试验，方法简便。也可用乳胶凝集试验和对流免疫电泳试验等检测血清中抗白假丝酵母菌抗体。(5)动物试验：将假丝酵母菌悬液注射1ml于家兔耳静脉或注射0.2ml于小白鼠尾静脉，假丝酵母菌对动物无致病性。第二十章病原性真菌(二)热带假丝酵母菌广泛分布于自然界，在人体表和外界相通的腔道中也存在。热带假丝酵母菌可引起皮肤、粘膜和内脏假丝酵母菌病。它除可在粘膜细胞上增殖引起感染外，其产生的毒素可引起过敏反应及产生的水解酶类引起组织损伤。第二十章病原性真菌微生物检验(1)直接显微镜检查：将标本作涂片革兰染色后镜检，观察Ｇ+假丝酵母菌。(2)分离培养与鉴定：将标本接种在沙氏培养基上形成色暗而干燥的菌落,取菌落作TZC反应。第二十章病原性真菌TZC反应即在葡萄糖蛋白胨琼脂内加入0．05g／L氯化三苯基四氮唑(TZC)，热带假丝酵母菌在此培养基上生长后使培养基变为深红色或紫色，而白假丝酵母菌不使培养基变色(淡红)，其他假丝酵母菌使培养基变为红色。再取菌落做糖发酵或同化试验、芽管形成较迟(血清中6h以上)，不形成厚膜孢子、动物试验阴性。第二十章病原性真菌二、隐球菌属包括17个种和7个变种，广泛分布于自然界，人体体表、口腔和肠道中。外源性感染,经呼吸道侵入，由肺经血行播散,可侵犯肺、脑及脑膜、皮肤、骨和关节。好发于细胞免疫功能低下者，如AIDS、恶性肿瘤、糖尿病、器官移植及大剂量使用糖皮质激素者。现已发现新生隐球菌、浅白隐球菌和罗伦隐球菌有致病性。第二十章病原性真菌(１)微生物特性在组织中呈圆形或卵圆形，直径一般在4～6μm，外周有宽厚荚膜，荚膜较菌大1～3倍，折光性强，一般染色法不易着色而难以发现而得名。常采用墨汁负染色法，在黑色景下可镜检到透亮菌体和宽厚荚膜。非致病性隐球菌无荚膜。第二十章病原性真菌（２）生物学多态性有A、B、C、D等4个血清型，归入两个变种组：①新生隐球菌新生变种，有性阶段为新生线黑粉菌，血清型为A、D；②新生隐球菌格特变种，有性阶段为棒杆孢线黑粉菌，血清型为B、C。用含刀豆氨酸、甘氨酸、溴麝香草酚蓝培养基可区分两