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植物提取物配伍发酵对枯草芽孢杆菌溶纤活性的影响

温伟盛吴恩法廖宏

（华南农业大学食品学院，广州510642）

摘要：通过对一系列中草药、水果、蔬菜的提取液并按一定的稀释度对纳豆杆菌共发酵，测

定其所得的纳豆激酶的活性大小，筛选出能极大地提高纳豆激酶活性的共发酵材料。结果表

明稀释10倍的绞股蓝浸提液和白萝卜汁液，苹果汁原液，苹果、雪梨、和草莓按１∶１∶

１的比例混合的原汁液对纳豆杆菌的产纤溶酶活的影响较大，几乎为空白对照的两倍，效果

明显，其中以绞股蓝的正面作用最为突出。

关键词：纳豆菌发酵纳豆激酶

纳豆作为一种日本传统功能性保健食品，不仅具有独特的风味和丰富的营养价值，而且

[1]

还具有许多生理学功能，例如溶纤活性、抗菌、减少骨质疏松、抗癌、提高蛋白质消化率、

[2]

调整肠功能等。纳豆是由纳豆菌发酵大豆生产，发酵过程中纳豆菌产生一种纤溶活性激酶，

对中老年人的心血管疾病的预防和治疗具有很好的保健功效。本试验试图通过从一系列中草

药、水果、蔬菜的提取液中与纳豆枯草芽孢杆菌共发酵，试图从中筛选出可促进纳豆菌产纳

豆激酶的材料，为进一步研究提供科学基础。

1材料与方法

1．1材料与设备

纳豆枯草芽孢杆菌(MBS04-6)，华南农业大学食品学院微生物实验室保存。

市售的中草药（姜黄、绞胶蓝、白果、山楂、银杏叶、桃仁、益母草、黄精、五味子）、

水果（苹果、雪梨、葡萄、草莓、西瓜、橙、香蕉）和蔬菜（大白菜、芹菜、蒜头洋葱、番

茄、胡萝卜、白萝卜）。

凝血酶（三九集团昆明白马制药有限公司）、冷干人纤维蛋白原（上海莱士血制品有限

公司）及其他国产分析纯试剂。

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．实验方法

1．2．1培养基

营养琼脂培养基：蛋白胨1%，牛肉膏0.5%，NaCl0.5%,琼脂2%，121℃、20min灭菌。

种子培养基：蛋白胨1%，酵母膏0.5%，NaCl0.6%,葡萄糖0.5%；121℃、20min灭菌。

基础培养基：可溶性淀粉2%，蛋白胨1%，

CaCl0.02%,MgSO0.04%,KHPO0.1%,KHPO0.1%；121℃、15min灭菌。

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发酵培养基（豆乳培养基）：豆乳10mL+基础培养基10mL+蒸馏水20mL（分别灭菌后

在无菌条件下加入并混合）

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．．工艺流程

菌种活化→扩大培养→接种

植物汁液提取

↓

稀释

↓

巴氏灭菌

黄豆→清洗→精选→浸泡→打浆→过滤→豆乳→灭菌→基础培养基

测NK活性↖

摇瓶发酵

保藏←冻干↙

1．3实验方法

1．3．1纳豆枯草芽孢杆菌的保存与活化

纳豆枯草芽孢杆菌斜面菌种置于4℃冰箱里保存，并且每2~3个月转种保藏一次。菌株

使用前先用营养琼脂培养基活化培养24小时。

1．3．2扩大培养

无菌条件下挑取斜面菌种两环到装有50mL(250mL三角瓶)种子培养基的三角瓶中，

37℃、200rpm摇瓶培养24小时。

1．3．3豆乳、中草药、水果及蔬菜提取液的制取

豆乳：将大豆洗净，除去杂质，用蒸馏水浸泡12小时后，放进打桨机（每次500ml蒸

馏水、50g干大豆），打豆桨后过滤两遍，105℃、5min灭菌。

中草药：每种取10克，放入水100mL，温火褒半小时，然后把所得的药液过滤，后把

滤液过滤，再把滤液按梯度稀释原溶液10倍，100倍，加上本身的原溶液，各取出10mL